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ssqq0809木蟲 (小有名氣)
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[求助]
Lowry 法測蛋白含量偏高是什么原因?
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我測一個混合多肽樣品的的蛋白含量,用Lowry法測定,乙液是買來的福林酚試劑,甲液是按照中國藥典方法自己配置的,用BSA做標(biāo)準(zhǔn)曲線,波長650nm,按照中國藥典的方法測定,標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2可達(dá)0.9998,說明線性還是可以的。可是測樣品的時候樣品的蛋白含量卻偏高,而且沒有重復(fù)性,有時候偏高多有時候偏高的少,樣品本身應(yīng)該是沒有問題的。現(xiàn)在找不到原因,甲液也重新配置了很多次了,福林酚試劑也買新的了,反應(yīng)時間也是嚴(yán)格控制的,可還是偏高。 請問各位高手,這個偏高可能是什么原因?qū)е碌。另外,我把測過的樣品放了個周末,本來周一看看時間對結(jié)果的影響,可是發(fā)現(xiàn)藍(lán)色都消失了,測了吸光度也基本沒有了,這個又是什么原因呢? |
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