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[求助]
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，求高手指點(diǎn)用什么溶解棕櫚酸？
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| 棕櫚酸用DMSO溶解的不是太好，加的量大又可能影響細(xì)胞生長(zhǎng)，請(qǐng)大家指點(diǎn)，用什么溶解較好，又不影響細(xì)胞生長(zhǎng)，萬(wàn)分感謝！ |
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Ewallcage
新蟲(chóng) (初入文壇)
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2型糖尿病是一種以糖脂代謝異常為主要表現(xiàn)的慢性代謝性疾病。在體外研究中，為了模擬2型糖尿病所致的器官損傷，除在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加高濃度的葡萄糖外，通常需要添加高濃度的軟脂酸（棕櫚酸，Palmitic acid）或軟脂酸鈉（棕櫚酸鈉，Sodium palmitate）。然而，現(xiàn)有配制方法不當(dāng)，市場(chǎng)上也無(wú)可直接使用的軟脂酸或軟脂酸鈉細(xì)胞添加劑，導(dǎo)致很多從事2型糖尿病的科研工作者無(wú)法順利開(kāi)展體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。 現(xiàn)有技術(shù)中，有人采用甲醇、乙醇、氫氧化鈉溶液等溶劑配制軟脂酸或軟脂酸鈉，其缺點(diǎn)是這些溶劑本身對(duì)細(xì)胞就有毒性，而且這些溶劑是否影響軟脂酸或軟脂酸鈉本身的性質(zhì)也不清楚。也有有人利用牛血清白蛋白（BSA）可與軟脂酸、或軟脂酸鈉結(jié)合的特點(diǎn)，采用高濃度的BSA溶液配制軟脂酸、或軟脂酸鈉。上述方法的優(yōu)點(diǎn)是溶劑本身對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性，但仍存在以下問(wèn)題：1.對(duì)BSA未進(jìn)行甄選，導(dǎo)致其結(jié)合力不足；2.未掌握溶解軟脂酸或軟脂酸鈉的合適條件，不能充分溶解軟脂酸或軟脂酸鈉；3.配制的BSA-軟脂酸、或BSA-軟脂酸鈉溶液很快有固體析出，不能有效發(fā)揮脂毒性。 我們的團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)整整一年的研究和努力，發(fā)明了一種無(wú)溶劑毒性、無(wú)固體析出、可長(zhǎng)期保存的軟脂酸/軟脂酸鈉高脂細(xì)胞添加劑，并在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中成功驗(yàn)證和推廣（Diabetes, 2017; Basci Res Cardiol, 2013），目前已與多個(gè)實(shí)驗(yàn)室確定了長(zhǎng)期合作關(guān)系。 |
3樓2018-02-09 15:56:56
yanshuai511
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+5, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn)！ 2013-10-29 01:32:01
小小笨笨虎: 金幣+10, ★★★很有幫助, 非常感謝 2013-10-30 09:19:08
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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小小笨笨虎: 金幣+10, ★★★很有幫助, 非常感謝 2013-10-30 09:19:08
| 我使用棕櫚酸處理的肝原代細(xì)胞，棕櫚酸濃儲(chǔ)液是200mM，用無(wú)水乙醇溶解。處理細(xì)胞使用的5%的不含脂肪酸的BSA稀釋的濃儲(chǔ)液（1:9），要在55度水浴鍋里溶解，然后再過(guò)濾分裝，防止反復(fù)凍融。 |
2樓2013-10-28 22:52:17
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4樓2022-02-11 16:21:20
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