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鄧滿(mǎn)鳳新蟲(chóng) (初入文壇)
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| 有哪位大俠做過(guò)磁性納米顆粒固定化漆酶？為什么我將0.1- 0.25%的戊二醛直接加入到1ml0.5mol/ml的漆酶溶液（包含了5mg的氨基化的二氧化硅）中，在冰箱中固定化12個(gè)小時(shí)后測(cè)酶活回收率怎么只有3%？可以幫忙分析下嗎 |
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鄧滿(mǎn)鳳
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2樓2013-10-29 14:35:21
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4樓2013-10-29 15:21:35
鄧滿(mǎn)鳳
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取6mg氨基活化的磁性二氧化硅納米顆粒分散到1ml濃度為0.5mg/ml漆酶溶液（用磷酸鹽緩沖液配置）中，加入20ul，0.1%的戊二醛，然后將反應(yīng)混合物置于4℃的恒溫?fù)u床上反應(yīng)13h，其中搖床的轉(zhuǎn)速為150rpm。反應(yīng)結(jié)束時(shí)，用磁鐵吸住磁性微球，傾去上清液。用磷酸鹽緩沖液（0.1M，PH 7）洗滌磁性納米顆粒，并且記錄好每次洗滌的體積，直到上清液檢測(cè)不到蛋白質(zhì)為止。將所制備的固定化漆酶保存在磷酸鹽緩沖液中。 活性收率=固定上的酶活力/相同量的游離酶的活力 固定化酶的活力是在線(xiàn)測(cè)5min ,得到吸光值與時(shí)間的關(guān)系，算出活力 以前用先交聯(lián)喜干凈后再加酶進(jìn)行固定化，條件跟上面說(shuō)的一樣，為什么這兩種方法測(cè)出來(lái)的活性收率這么低？真心希望得到你的指導(dǎo)，謝謝！ |
5樓2013-10-31 18:50:45
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