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[求助]
黑曲霉原生質(zhì)體制作只見斷裂菌絲而無(wú)原生質(zhì)體 已有1人參與
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做了幾次黑曲霉原生質(zhì)體都沒有成功，著實(shí)郁悶。 在ME液體培養(yǎng)基里接種孢子，培養(yǎng)16小時(shí)收集菌球。試了裂解酶、蝸牛酶、纖維素酶的混合液，用1.0M和1.2M山梨醇做滲透壓穩(wěn)定劑，100rpm裂解2-3小時(shí)，培養(yǎng)基里有很多裂解下來(lái)的長(zhǎng)條菌絲，但是看不到圓圓的原生質(zhì)體。酶解4-5小時(shí)，菌絲被裂解得很短了，還是沒有原生質(zhì)體。 請(qǐng)教有經(jīng)驗(yàn)的大俠，是不是如果滲透壓合適，只要菌絲斷裂，斷裂處就應(yīng)該釋放原生質(zhì)體？我的實(shí)驗(yàn)是酶的用量的問(wèn)題還是滲透壓的問(wèn)題？ 我也看了論壇的帖子，試了一下研磨菌球再制作原生質(zhì)體，可是研磨后孢子也分散在培養(yǎng)基里，即便有原生質(zhì)體形成，也無(wú)法將兩者區(qū)分。 |
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sophia7168
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