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ssizle新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助，吡嗪酰胺液相分析
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現(xiàn)在在摸索一個(gè)分析吡嗪酰胺和它代謝物的液相方法，目前用的是C18柱，流動(dòng)相是甲醇-乙酸銨，甲酸，但因?yàn)槲镔|(zhì)極性很大，等度洗脫，出峰很早，最早的一個(gè)目標(biāo)峰在3.5min左右出峰，最晚的一個(gè)6分鐘左右也就出來(lái)了，水相比例已經(jīng)達(dá)到90%了，不能再提高水相比例來(lái)延長(zhǎng)出峰時(shí)間了，然后跑了一下空白血漿，分別用甲醇和三氯乙酸沉淀蛋白，但內(nèi)源性雜質(zhì)峰都在3~4min左右，對(duì)待測(cè)物有干擾，有試過(guò)梯度，大概是2min內(nèi)高比例水相沖洗，然后提高甲醇相，讓目標(biāo)峰在4~9分鐘內(nèi)出來(lái)，再繼續(xù)提高甲醇相，希望讓雜質(zhì)出峰，然后又回復(fù)高比例水相，但結(jié)果是最早的一個(gè)目標(biāo)峰推遲到5分鐘左右了，但雜質(zhì)峰也是那個(gè)時(shí)間出峰，還是沒(méi)有辦法把雜質(zhì)峰和目標(biāo)峰分開(kāi)。 調(diào)甲酸、調(diào)流動(dòng)相的方法已經(jīng)試了很多了，感覺(jué)改變不明顯，現(xiàn)在就想知道梯度這個(gè)還能怎么調(diào)嗎？或者不行就只有換柱子了，沒(méi)有錢(qián)買(mǎi)純水柱，想換個(gè)氨基柱或氰基柱試試，不知道可以嗎？我的待測(cè)物極性都蠻大的，一個(gè)是含有酰胺基 一個(gè)是含有羧基，不知道各位還有什么辦法嗎？？ 先謝謝大家了，求大家?guī)兔Γ? |
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蘆葦悠幽AN
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2樓2017-06-19 09:15:10
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