 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2291 | 回復(fù): 5 | ||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
jbj1001銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
詭異的qPCR結(jié)果，請大家?guī)兔忉屜?
|
|
|
樣品是小鼠的二細胞胚胎，做GAPDH的標準曲線，出現(xiàn)的結(jié)果讓我很困惑。用的是ABI的Arcturus® PicoPure™ RNA Isolation Kit，號稱能夠提取單個細胞的RNA，但由于由于收集的胚胎不多，所以提取的RNA的量還是比較少的，大約有40多ng在10ul反轉(zhuǎn)錄體系里面。今天做標準曲線時取了其中的3.5ul先稀釋10倍到35ul，然后依次按照5倍的梯度稀釋。實時定量PCR用的試劑盒是TAKARA的DRR820，機器是ABI7500。 看完附圖后，我的問題是 1. 為什么625、125倍濃度的擴增曲線在一開始就出現(xiàn)峰，而ct值也分別只有15、25左右？ 2. 我以5倍濃度的梯度稀釋，為什么ct值會相差10左右？ 3. 忽略掉最低兩個濃度后的標準曲線slope：-12.24，Y-inter：55.271，R2：0.998，EFF%：17.551，這正常嗎？ 標準曲線.png 最后兩個濃度去掉以后的標曲.png 625倍濃度（最高濃度）的擴增曲線.png 125倍濃度的擴增曲線.png 25倍濃度的擴增曲線.png 5倍濃度的擴增曲線.png |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有275人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- qPCR的怪異結(jié)果
已經(jīng)有4人回復(fù)
jbj1001
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 金幣: 510.5
- 帖子: 131
- 在線: 67.9小時
- 蟲號: 753465
- 注冊: 2009-04-20
- 專業(yè): 血糖調(diào)控異常與胰島素抵抗
4樓2013-11-07 10:03:11
匿名
用戶注銷 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1322.5
- 散金: 419
- 紅花: 8
- 帖子: 594
- 在線: 52.9小時
- 蟲號: 0
- 注冊: 2009-09-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2013-11-05 00:13:13
沙門小rna
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 28 (小學(xué)生)
- 金幣: 1117.7
- 散金: 5
- 紅花: 6
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 644
- 在線: 76.7小時
- 蟲號: 2012528
- 注冊: 2012-09-19
- 專業(yè): 病原細菌、細菌感染與宿主
3樓2013-11-05 14:42:41
沙門小rna
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 28 (小學(xué)生)
- 金幣: 1117.7
- 散金: 5
- 紅花: 6
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 644
- 在線: 76.7小時
- 蟲號: 2012528
- 注冊: 2012-09-19
- 專業(yè): 病原細菌、細菌感染與宿主
jbj10015樓2013-11-07 10:33:59
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +4 | 于海海海海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +9 | rare12345 2026-03-18 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +3 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +10 | 呼呼呼。。。。 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +12 | 小熊joy 2026-03-14 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 冷笙123 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[基金申請] 被我言中：新模板不強調(diào)格式了，假專家開始管格式了 +4 | beefly 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +8 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿，福州大學(xué)材料專碩339分求調(diào)劑 +3 | 木子momo青爭 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | 聽風(fēng)就是雨； 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 0703方向310分求調(diào)劑 +3 | 努力奮斗112 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿211 285分求調(diào)劑 +5 | ly3471z 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學(xué)調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 22408總分284求調(diào)劑 +3 | InAspic 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學(xué)一志愿川大藥學(xué)327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調(diào)劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|