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lingboweike金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
IC50 和細(xì)胞凋亡之間的濃度關(guān)系
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各位大俠,我是做有機(jī)合成的,現(xiàn)在需要些生物方面的知識(shí),希望大家指導(dǎo)一二。。 我做出了十幾個(gè)化合物,需要測(cè)其抗腫瘤活性,和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)。就是不確定,IC50和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)的濃度關(guān)系,希望知道的蟲(chóng)友幫助解答。越詳細(xì)越好,謝謝大家! |
金蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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1.IC50半數(shù)抑制濃度,此時(shí)一般指半數(shù)致死量,即存活50%(相對(duì)對(duì)照組)時(shí)的給藥濃度。直接反映藥物對(duì)細(xì)胞殺傷作用的強(qiáng)弱。 2.凋亡實(shí)驗(yàn)中,一般的細(xì)胞存活率要控制在50%左右,高于80%凋亡細(xì)胞過(guò)少,低于20%細(xì)胞損傷過(guò)于嚴(yán)重(單純的細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以是低于20%的)導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)目和完整性較差。 |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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一般先用96孔板測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞的毒性。用MTT法就行。此時(shí)要用不同濃度的藥物處理細(xì)胞,看不同時(shí)間的存活率,挑選合適的給藥劑量和時(shí)間。確定了給藥劑量和時(shí)間后,放大到24孔板或細(xì)胞培養(yǎng)瓶(不同的流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞數(shù)目要求不同)做流式。因?yàn)榈蛲鲈缙诤屯砥谥笜?biāo)不同,建議試一下不同時(shí)間藥物處理。至于濃度梯度,要根據(jù)MTT的結(jié)果確定,一般會(huì)設(shè)高,中,低三個(gè)劑量或高低兩個(gè)劑量,梯度要看藥物的敏感性,不同梯度要有顯著差異,并有明顯的劑量依賴關(guān)系?梢韵劝次墨I(xiàn)上下個(gè)加一個(gè)數(shù)量級(jí)測(cè)MTT。再根據(jù)MTT結(jié)果確定IC50和給藥濃度。 |
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