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lingboweike金蟲 (小有名氣)
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[求助]
IC50 和細(xì)胞凋亡之間的濃度關(guān)系
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各位大俠，我是做有機(jī)合成的，現(xiàn)在需要些生物方面的知識(shí)，希望大家指導(dǎo)一二。。 我做出了十幾個(gè)化合物，需要測其抗腫瘤活性，和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)。就是不確定，IC50和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)的濃度關(guān)系，希望知道的蟲友幫助解答。越詳細(xì)越好，謝謝大家！ |
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hl16010921
木蟲 (正式寫手)
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一般先用96孔板測定藥物對細(xì)胞的毒性。用MTT法就行。此時(shí)要用不同濃度的藥物處理細(xì)胞，看不同時(shí)間的存活率，挑選合適的給藥劑量和時(shí)間。確定了給藥劑量和時(shí)間后，放大到24孔板或細(xì)胞培養(yǎng)瓶（不同的流式細(xì)胞儀對細(xì)胞數(shù)目要求不同）做流式。因?yàn)榈蛲鲈缙诤屯砥谥笜?biāo)不同，建議試一下不同時(shí)間藥物處理。至于濃度梯度，要根據(jù)MTT的結(jié)果確定，一般會(huì)設(shè)高，中，低三個(gè)劑量或高低兩個(gè)劑量，梯度要看藥物的敏感性，不同梯度要有顯著差異，并有明顯的劑量依賴關(guān)系�？梢韵劝次墨I(xiàn)上下個(gè)加一個(gè)數(shù)量級(jí)測MTT。再根據(jù)MTT結(jié)果確定IC50和給藥濃度。 |
4樓2013-11-04 15:05:02
hl16010921
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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lingboweike: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-11-04 14:31:44
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1.IC50半數(shù)抑制濃度，此時(shí)一般指半數(shù)致死量，即存活50%（相對對照組）時(shí)的給藥濃度。直接反映藥物對細(xì)胞殺傷作用的強(qiáng)弱。 2.凋亡實(shí)驗(yàn)中，一般的細(xì)胞存活率要控制在50%左右，高于80%凋亡細(xì)胞過少，低于20%細(xì)胞損傷過于嚴(yán)重（單純的細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以是低于20%的）導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)目和完整性較差。 |
2樓2013-11-04 14:17:38
lingboweike
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3樓2013-11-04 14:38:24
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6樓2014-12-31 09:39:25
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