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浩子jerry金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
(ˇˍˇ） 想～
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[求助]
細(xì)胞pull down實(shí)驗(yàn)，蛋白電泳上了三個(gè)樣，只有第一個(gè)出現(xiàn)，怎么才能讓后兩個(gè)出現(xiàn)呢？
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小弟在做細(xì)胞的pull down實(shí)驗(yàn)，提取了3次蛋白，跑電泳，然后考染，第一次出來(lái)了，后兩次木有，而且陰性對(duì)照也沒(méi)出現(xiàn)，是pull down 時(shí)候沒(méi)提出來(lái)么？做pull down 時(shí)候要注意哪些�。空�(qǐng)各位大俠多多指教啊 20131025考染膠.gif 20131101-2.gif |
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浩子jerry
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
(ˇˍˇ） 想～
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3樓2013-11-05 18:37:44
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流！ 2013-11-05 11:51:48
浩子jerry: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-11-05 18:38:53
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你可以增加上樣量試一下，還有就是你可以用western bolt做一下，有可能是因?yàn)榈鞍琢刻�，染色不行，但是做western的化蛋白量很少抗體也能檢測(cè)到。 做PULL DOWN應(yīng)該注意的主要就是兩個(gè)蛋白的結(jié)合時(shí)間，不要過(guò)短，過(guò)短的化結(jié)合的不徹底，也不要太長(zhǎng)，太長(zhǎng)的話越容易降解。 暫時(shí)就想到這么多，希望對(duì)你的實(shí)驗(yàn)有幫助。 |
2樓2013-11-04 21:16:34
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