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[交流]
紫外可見分光光度計(jì) 的F值設(shè)置問題
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| 大家用紫外可見分光光度計(jì)時，有沒有設(shè)置那個F值（斜率），那個值是要自己確定還是固定的，跟做出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率有什么關(guān)系呢？ |
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千年蝶戀(金幣+2): 謝謝參與
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這個不需要設(shè)置吧。這個應(yīng)該你想要的。下次可以先百度，再來木蟲吧。。。不過也謝謝你，讓我也長了點(diǎn)知識。 752紫外可見分光光度計(jì) 一、儀器的工作原理 分光光度計(jì)的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射激發(fā)下，產(chǎn)生了對光的吸收效應(yīng)，物質(zhì)對光的吸收是具有選擇性的。各種不同的物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系，也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 從以上公式可以看出，當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液的光徑長度不變時．透過的光是根據(jù)溶液的濃度而變化的，752紫外可見分光光度計(jì)的基本原理是根據(jù)上述物理光學(xué)現(xiàn)象而設(shè)計(jì)的。 二、儀器的安裝、使用、安裝 1 儀器在安裝使用前應(yīng)對儀器的安全性進(jìn)行檢查，電源電壓是否正常，接地線是否牢固可靠，在得到確認(rèn)后方和接通電源使用。 2 儀器經(jīng)過運(yùn)輸和搬運(yùn)等原因，會影響波長準(zhǔn)確度，應(yīng)進(jìn)行儀器調(diào)校后使用。 使用：儀器使用前需開機(jī)預(yù)熱30min。 本儀器鍵盤共有4個鍵，分別為； 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽／0％ 3∆／100％ 4 A /τ/C/F鍵：每按此鍵來切換A、τ 、C、F之間的值。 A——吸光度（Absorbance） T——透射比（Trans） C——濃度（conc） F——斜率（Factor） (2)F值通過按鍵輸入（后面介紹如何設(shè)置） 5SD鍵：該鍵具有2個功能 a)用于RS232串行口和計(jì)算機(jī)傳輸數(shù)據(jù)（單向傳輸數(shù)據(jù)，儀器發(fā)向計(jì)算機(jī)）。 b)當(dāng)處于F狀態(tài)時，具有確認(rèn)的功能，即確認(rèn)當(dāng)前的F值，并自動轉(zhuǎn)到C，計(jì)算當(dāng)前的C值（C=F*A）。 6 ▽／0％鍵：該鍵具有2個功能 a）調(diào)零；只有在τ狀態(tài)時有效，打開樣品室蓋，按鍵后應(yīng)顯示0.000。 b）下降鍵：只有在F狀態(tài)時有效，按本鍵F值會自動減1，如果按住本鍵不放，目動減1會加快速度；如果F值為0后，再按鍵它會自動變?yōu)?999。而按鍵開始自動減1。 7 ∆／100％鍵；該鍵具有2個功能 a）只有在A、τ狀態(tài)時有效，關(guān)閉樣品室蓋，按鍵后應(yīng)顯示0.000、100.0。 b）上升鍵：只有在F狀態(tài)時有效，按本鍵F值會自動加1，如果按住本鍵不放，自動加1會加快速度，如果F值為1999后，再按鍵它會自動變?yōu)?，再往鍵開始自動加l。 例如：設(shè)置斜率為1500。 方法一 T）按 A／τ／C／F鍵切換到 F狀態(tài)。 b）如果當(dāng)前F值為1000，則按∆／100%鍵，直到F值為1500。 C）再按 SD鍵，表示當(dāng)前的 F值為 1500，然后自動回到 C狀態(tài)，假如所測的 A值為 0．234，則此時顯示 C值為 0351。 方法二 a）按A／τ／C／F鍵切換到F狀態(tài)。 b）如果當(dāng)前的 F值為 1000，則按∆／100%鍵，直到F值為 1500、再按 A／τ／C／F鍵切換到C狀態(tài)，假如所測的A值為0.224，則此時顯示C值為0351。 722型分光光度計(jì) 一、 測量原理 分光光度法測量的理論依據(jù)是伯郎—比耳定律：當(dāng)容液中的物質(zhì)在光的照射和激發(fā)下，產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng)。但物質(zhì)對光的吸收是有選擇性的，各種不同的物質(zhì)都有其各自的吸收光譜。所以根據(jù)定律當(dāng)一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時，溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度c（g/l）或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達(dá)式A=abc （a是比例系數(shù)）。當(dāng)c的單位為mol/l時，比例系數(shù)用ε表示，則A=εbc稱為摩爾吸光系數(shù)。其單位為L•mol-1•cm-1它是有色物質(zhì)在一定波長下的特征常數(shù)。 T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K•C•L(比色皿的厚度) 測定時，入射光I, 吸光系數(shù)和溶液的光徑長度不變時，透過光是根據(jù)溶液的濃度而變化的，即“K”為常數(shù)。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要測出A即可算出“C”。 二、 722型分光光度計(jì)的使用 1、將靈敏度旋鈕調(diào)至“1”檔（信號放大倍率最�。� 2、開啟電源，指示燈亮 ，選擇開關(guān)置于“T”，波長調(diào)至到測試用波長。儀器預(yù)熱20分鐘。 3、打開試樣室（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)透光率零點(diǎn)旋鈕，使數(shù)字顯示為000.0。（調(diào)節(jié)100%T旋鈕），蓋上試樣室蓋，將比色皿 架處于蒸餾水校正位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透光率100%旋鈕使數(shù)字顯示100.0。如顯示不到100.0，則可適當(dāng)增加微電流放大的倍數(shù)。（增加靈敏度 的檔數(shù)同時應(yīng)重復(fù)（3）調(diào)節(jié)儀器透光率的“0”位）但盡量使倍率置于低檔使用。這樣儀器會有更高的穩(wěn)定性。 4、預(yù)熱后，按（3）連續(xù)幾次調(diào)整透光率的“0”位和“100%”的位置，待穩(wěn)定后儀器可進(jìn)行測定工作。 三、 吸光度“A”的測量 將選擇開關(guān)置于A 。調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為零，然后將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。 四、 濃度c的測量 將選擇開關(guān)由“A”旋至“C”將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測樣品放入光路即可讀出被測樣品的濃度值。 注意事項(xiàng)： 1、測量完畢，速將暗盒蓋打開，關(guān)閉電源開關(guān)，將靈敏度旋鈕調(diào)至最低檔，取出比色皿，將裝有硅膠的干燥劑袋放入暗盒內(nèi)，關(guān)上蓋子，將比色皿中的溶液倒入燒杯中，用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內(nèi)。 2、每臺儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調(diào)換。 使用方法 （1）預(yù)熱儀器 將選擇開關(guān)置于“T”，打開電源開關(guān)，使儀器預(yù)熱20分鐘。為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照，預(yù)熱儀器時和不測定時應(yīng)將試樣室蓋打開，使光路切斷。 （2）選定波長 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，轉(zhuǎn)動波長手輪，調(diào)至所需要的單色波長。 （3）固定靈敏度檔 在能使空白溶液很好地調(diào)到“100%”的情況下，盡可能采用靈敏度較低 的擋，使用時，首先調(diào)到“1”擋，靈敏度不夠時再逐漸升高。但換擋改變靈敏度后，須重新校正“0%”和“100%”。選好的靈敏度，實(shí)驗(yàn)過程中不要再變動。 （4）調(diào)節(jié)T=0% 輕輕旋動“0%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”，（此時試樣室是打開的）。 （5）調(diào)節(jié)T=100% 將盛蒸餾水（或空白溶液，或純?nèi)軇┑谋壬蠓湃氡壬笞苤械牡谝桓駜?nèi)，并對準(zhǔn)光路，把試樣室蓋子輕輕蓋上，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示正好為“100.0”。 （6）吸光度的測定 將選擇開關(guān)置于“A”，蓋上試樣室蓋子，將空白液置于光路中，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)節(jié)旋鈕，使數(shù)字顯示為“.000”。將盛有待測溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格內(nèi)，蓋上試樣室蓋，輕輕拉動試樣架拉手，使待測溶液進(jìn)入光路，此時數(shù)字顯示值即為該待測溶液的吸光度值。讀數(shù)后，打開試樣室蓋，切斷光路。 重復(fù)上述測定操作1-2次，讀取相應(yīng)的吸光度值，取平均值。 （7）濃度的測定 選擇開關(guān)由“A”旋置“C”，將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測樣品放入光路，此時數(shù)字顯示值即為該待測溶液的濃度值。 （8）關(guān)機(jī) 實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架用軟紙擦凈。、。 |
13樓2013-11-06 06:58:45
3樓2013-11-05 10:44:04
12樓2013-11-05 21:55:09
簡單回復(fù)
2013-11-05 10:53
回復(fù)
千年蝶戀(金幣+2): 謝謝參與
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