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sample buffer配方是不是會影響蛋白多聚體的裂解。
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| 我在做a-syn的WB。分子量大概在19kD左右。因為有多聚體所以常常在30+，40+的位子有條帶。別人文獻中在19的位子條帶很明顯，但是我做出來19位子的條帶卻沒有。30+，40+的位子倒挺明顯的。是不是我的sample buffer有問題我的配方是1 M trisHcl6.8 0.6ml；50%甘油1ml；10%SDS 2ml；水6.4ml。加了sample buffer后100度加熱10min。大家覺得問題可能出在哪里？ |
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cicelyzh
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2樓2013-11-07 06:34:41
3樓2013-11-07 10:20:49
cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-08 08:27:18
David勇: 金幣+10, ★★★★★最佳答案, 好的，謝謝，我試試看 2013-11-08 10:07:34
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David勇: 金幣+10, ★★★★★最佳答案, 好的，謝謝，我試試看 2013-11-08 10:07:34
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2X loading buffer: 125mM Tris pH6.8, 25% (v/v) glycerol, 4% SDS, 10% β-mercaptoethanol 我常用的是這個配方。緩沖體系的pH與濃縮膠相同。如果你喜歡DTT，一般用的tris的pH要在堿性范圍。 |
4樓2013-11-08 01:35:29
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