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sample buffer配方是不是會(huì)影響蛋白多聚體的裂解。
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| 我在做a-syn的WB。分子量大概在19kD左右。因?yàn)橛卸嗑垠w所以常常在30+,40+的位子有條帶。別人文獻(xiàn)中在19的位子條帶很明顯,但是我做出來(lái)19位子的條帶卻沒(méi)有。30+,40+的位子倒挺明顯的。是不是我的sample buffer有問(wèn)題我的配方是1 M trisHcl6.8 0.6ml;50%甘油1ml;10%SDS 2ml;水6.4ml。加了sample buffer后100度加熱10min。大家覺(jué)得問(wèn)題可能出在哪里? |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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2X loading buffer: 125mM Tris pH6.8, 25% (v/v) glycerol, 4% SDS, 10% β-mercaptoethanol 我常用的是這個(gè)配方。緩沖體系的pH與濃縮膠相同。如果你喜歡DTT,一般用的tris的pH要在堿性范圍。 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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