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我要吃西瓜金蟲 (初入文壇)
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[求助]
如何選擇原核表達(dá)所要用到的限制性內(nèi)切酶 已有1人參與
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如題，本人新手，最近要做原核表達(dá)，請(qǐng)問有沒有什么軟件可以用來分析所需要用的限制性內(nèi)切酶，直接給出推薦結(jié)果的那種，用DNAman得出來的還要一個(gè)個(gè)去看太麻煩了。。 |
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kehan777
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2樓2013-11-09 10:59:08
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3樓2014-09-25 22:06:17
kehan777
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【答案】應(yīng)助回帖
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-09-27 17:51:50
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non-cutters就是你分析的片段中沒有的酶切位點(diǎn)。 基因片段沒有的內(nèi)切酶中和載體中有的內(nèi)切酶中，選擇一個(gè)常用的，對(duì)！ 即能切開載體，也能切開基因片段？ 這是基因片段末端補(bǔ)上了（本身沒有）和載體上相同的酶切位點(diǎn)后，才有的；怎么補(bǔ)？可以通過全基因合成，或者合成引物后PCR。 之后通過酶切切基因片段和載體，它們就有了相同的末端，就可以通過連接酶連接起來，形成一個(gè)環(huán)狀的質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)化到菌里面克隆，表達(dá)。 |
4樓2014-09-26 08:57:29
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