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[求助]
求助,3’RACE無目的條帶只有2000bp左右的非特異性條帶擴增!
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情況是這樣的,這個基因的外顯子我?guī)熃阋呀洈U出來了,只差3‘端序列,我就根據(jù)她已得到的cDNA序列設計了五個特異性引物去跑3’RACE,目的條帶大概就150-500bp左右,但PCR跑完之后看膠,其中4個引物在2500bp左右出現(xiàn)了很明顯很亮的條帶,但目的基因可能出現(xiàn)的區(qū)域什么都沒有,還有一個引物只有引物二聚體的樣子。但是我這個基因cDNA全長也就不到1000bp,完全不知道這個條帶哪里來的……師兄表示沒遇見過這種情況,我真的有點束手無策啊…… 新人各種求教,求解惑!大概可能是哪個環(huán)節(jié)出的問題…… |
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