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肥貓p木蟲 (正式寫手)
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[交流]
我的實(shí)際使用情況談各公司pcr mix的宿主基因組殘留問題 已有3人參與
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一，天根的taq pcr mix，藍(lán)色。正常價(jià)錢是150元每mL，做活動買5mL送5mL，就是相當(dāng)于75元每mL。感覺還是略貴，但是做一般的pcr用著還不錯。 二，TAKARA的綠色mix。這種mix我沒買過，是從別的實(shí)驗(yàn)室要了一點(diǎn)來試用，感覺pcr的條帶比較暗，后來我查了一下它的說明書，貌似里面酶量只是普通pcr的一半。大約是30多元每mL吧。個人感覺，雖然條帶不太亮，用來做個菌p或是驗(yàn)證類的pcr還行，可以看到條帶；至于其余的比較重要一點(diǎn)的pcr，慎用。 三，康為世紀(jì)的Taq MasterMix，藍(lán)色。促銷價(jià)是166元5mL。 四，康為世紀(jì)的Es Taq MasterMix，藍(lán)色。促銷價(jià)是187元5mL。我打電話問過技術(shù)支持，ES Taq與TAq的區(qū)別，答曰：ES Taq的保真行和延伸性更好。從延伸性來講，我個人感覺差不多。我用康為世紀(jì)的Taq MasterMix 擴(kuò)增3kb的條帶，沒什么問題；用Es Taq MasterMix擴(kuò)增5kb的條帶，目的條帶不太明顯，泳道有彌散的感覺。至于保真性，我沒試過，感覺不太靠譜，只能呵呵。 前兩天看見小木蟲有人發(fā)帖子反映百泰克的2*PCR-MIX里面有宿主菌的基因組殘留。于是今天我也試了一下，分別使用天根的taq pcr mix（一）、康為世紀(jì)的Taq MasterMix（三）、康為世紀(jì)的Es Taq MasterMix（四），不加模板，以16S 通用引物27f和1492r進(jìn)行pcr擴(kuò)增30循環(huán)，取5uL上樣電泳。結(jié)果是：天根的taq pcr mix（一）有一條很暗淡的目的大小條帶；康為世紀(jì)的Taq MasterMix（三）無可見條帶；康為世紀(jì)的Es Taq MasterMix（四）有一條特別亮的目的大小條帶，比marker還亮的那種！我是震驚了。我不確定這些結(jié)果是產(chǎn)品批次偶爾有質(zhì)量問題，還是一直存在。 所以，還是請需要做環(huán)境樣品文庫的蟲子們，在擴(kuò)增16S片段的時候，謹(jǐn)慎使用酶吧。 |
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2樓2013-11-18 12:16:49
3樓2017-05-23 22:33:28
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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我用takara的就有問題。菌落pcr成功率為零。舉報(bào)的是公司員工吧。使用者連這種都不能交流。還有更多人浪費(fèi)時間金錢在這無謂之中。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-05-23 22:35:23
妙語1989
金蟲 (小有名氣)
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5樓2019-05-06 10:04:29
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