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肥貓p木蟲 (正式寫手)
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[交流]
我的實(shí)際使用情況談各公司pcr mix的宿主基因組殘留問(wèn)題 已有3人參與
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一,天根的taq pcr mix,藍(lán)色。正常價(jià)錢是150元每mL,做活動(dòng)買5mL送5mL,就是相當(dāng)于75元每mL。感覺(jué)還是略貴,但是做一般的pcr用著還不錯(cuò)。 二,TAKARA的綠色mix。這種mix我沒(méi)買過(guò),是從別的實(shí)驗(yàn)室要了一點(diǎn)來(lái)試用,感覺(jué)pcr的條帶比較暗,后來(lái)我查了一下它的說(shuō)明書,貌似里面酶量只是普通pcr的一半。大約是30多元每mL吧。個(gè)人感覺(jué),雖然條帶不太亮,用來(lái)做個(gè)菌p或是驗(yàn)證類的pcr還行,可以看到條帶;至于其余的比較重要一點(diǎn)的pcr,慎用。 三,康為世紀(jì)的Taq MasterMix,藍(lán)色。促銷價(jià)是166元5mL。 四,康為世紀(jì)的Es Taq MasterMix,藍(lán)色。促銷價(jià)是187元5mL。我打電話問(wèn)過(guò)技術(shù)支持,ES Taq與TAq的區(qū)別,答曰:ES Taq的保真行和延伸性更好。從延伸性來(lái)講,我個(gè)人感覺(jué)差不多。我用康為世紀(jì)的Taq MasterMix 擴(kuò)增3kb的條帶,沒(méi)什么問(wèn)題;用Es Taq MasterMix擴(kuò)增5kb的條帶,目的條帶不太明顯,泳道有彌散的感覺(jué)。至于保真性,我沒(méi)試過(guò),感覺(jué)不太靠譜,只能呵呵。 前兩天看見(jiàn)小木蟲有人發(fā)帖子反映百泰克的2*PCR-MIX里面有宿主菌的基因組殘留。于是今天我也試了一下,分別使用天根的taq pcr mix(一)、康為世紀(jì)的Taq MasterMix(三)、康為世紀(jì)的Es Taq MasterMix(四),不加模板,以16S 通用引物27f和1492r進(jìn)行pcr擴(kuò)增30循環(huán),取5uL上樣電泳。結(jié)果是:天根的taq pcr mix(一)有一條很暗淡的目的大小條帶;康為世紀(jì)的Taq MasterMix(三)無(wú)可見(jiàn)條帶;康為世紀(jì)的Es Taq MasterMix(四)有一條特別亮的目的大小條帶,比marker還亮的那種!我是震驚了。我不確定這些結(jié)果是產(chǎn)品批次偶爾有質(zhì)量問(wèn)題,還是一直存在。 所以,還是請(qǐng)需要做環(huán)境樣品文庫(kù)的蟲子們,在擴(kuò)增16S片段的時(shí)候,謹(jǐn)慎使用酶吧。 |
有價(jià)值的生物經(jīng)驗(yàn)貼 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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我用takara的就有問(wèn)題。菌落pcr成功率為零。舉報(bào)的是公司員工吧。使用者連這種都不能交流。還有更多人浪費(fèi)時(shí)間金錢在這無(wú)謂之中。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
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