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[求助]
多糖純化關(guān)于DEAE
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| 最近在做多糖純化，已經(jīng)醇沉完畢，直接上了DEAE，發(fā)現(xiàn)大部分物質(zhì)直接被洗脫下來了，雖然有部分被保留，但是量很少。按照DEAE的分離機(jī)理來說該樹脂屬于離子交換型樹脂，本來應(yīng)該有一定的吸附，如色素，蛋白，但是蛋白在純水后峰很低，色素就基本沒有吸附。請問這個是什么情況，我分離的是硫酸多糖，本想重復(fù)下他們的實(shí)驗(yàn)。但是結(jié)果不好啊。請各位大俠不吝賜教。 |
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hsd3521
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heyutang
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
da1234mao: 金幣+20, ★★★很有幫助 2013-11-19 16:03:21
da1234mao: 金幣+75, ★★★★★最佳答案 2013-11-19 18:32:09
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| DEAE是陰離子交換柱，你的樣品很快洗脫下來，說明沒有吸附上。你應(yīng)該用緩沖液溶解樣品并上樣，提高一下緩沖液的pH有助于吸附。如果還是無法吸附則有可能你的多糖帶正電荷，應(yīng)該用陽離子交換柱純化。正規(guī)的廠家出的填料應(yīng)該沒有問題。祝你試驗(yàn)成功。 |
9樓2013-11-19 13:33:12
10樓2013-11-26 10:44:05
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