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1066479423銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
細(xì)胞污染問(wèn)題
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最近細(xì)胞總是污染，看著像是葡萄球菌，能不能再培養(yǎng)基里另外再加上抑制葡萄球菌的抗生素？？？？或者是平常有哪些需要注意的？？？ 謝謝 |
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gyesang
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9樓2013-11-25 20:30:56
myprayer
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【答案】應(yīng)助回帖
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-11-24 21:46:48
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-11-24 21:46:48
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加入雙抗了嗎？如果你覺(jué)得是菌污染的話，你可以做對(duì)照試驗(yàn)組。 一個(gè)培養(yǎng)瓶里面加雙抗，一個(gè)不加，定期觀察，有無(wú)黑點(diǎn)，細(xì)胞形態(tài)之類的。 還有弱弱的說(shuō)一句 細(xì)胞污染原因千奇百怪，一下子要說(shuō)明為什么污染，污染源是什么，還是不怎么容易的。要長(zhǎng)期摸索。 1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。 仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！ 可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理 污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等 關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng) 就是操作的問(wèn)題。 也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）或者鏈霉素和青霉素這個(gè)看細(xì)胞類了。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 一些小的tips： 培養(yǎng)基重要性不說(shuō)，你的操作，凈化間的環(huán)境，培養(yǎng)箱的水，紫外線，以及洗消過(guò)程中的任何一個(gè)環(huán)節(jié)。。。 平時(shí)養(yǎng)成好習(xí)慣。 |
2樓2013-11-24 12:40:04
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你好，謝謝。培養(yǎng)基是加雙抗的，以前剛養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候都沒(méi)有污染過(guò)，現(xiàn)在養(yǎng)的多了，污染的更經(jīng)常了。現(xiàn)在是要么是復(fù)蘇室污染，要么是換液后污染�，F(xiàn)在在兩個(gè)細(xì)胞房同時(shí)養(yǎng)細(xì)胞，在另外一個(gè)養(yǎng)細(xì)胞不加抗生素都沒(méi)有事情。我想應(yīng)該是細(xì)胞的原因，現(xiàn)在想要問(wèn)一下，有沒(méi)有對(duì)葡萄球菌有特效并且可以加到細(xì)胞培養(yǎng)的抗生素？ |
3樓2013-11-24 20:53:00
gyesang
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4樓2013-11-24 21:11:04
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