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gruyclewee榮譽(yù)版主 (文壇精英)
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[求助]
關(guān)于MRM方法測定血藥濃度時(shí)內(nèi)標(biāo)曲線的繪制問題 已有1人參與
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本人近來看了一些關(guān)于MRM測定血液、血漿或者尿液等人體液中藥物濃度的文獻(xiàn)。 采用的方法一般都是用LC-MS/MS的MRM模式進(jìn)行采集,然后一般都會(huì)加入內(nèi)標(biāo)進(jìn)行校正。 有一個(gè)問題一直都困惑著我,我看這些文章繪制標(biāo)準(zhǔn)校正曲線的時(shí)候有兩種方式: (1)一種是將測的藥物標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)加到不含該藥物的空白血漿/尿液中,然后用MRM采集數(shù)據(jù),用藥物的峰面積對(duì)內(nèi)標(biāo)的峰面積之比vs藥物濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后計(jì)算其線性范圍等等。 (2)另外一種方式是要測的藥物標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)不加到不含該藥物的空白血漿/尿液中(即不加到基質(zhì)中),直接用水或者流動(dòng)相溶解,然后用MRM采集數(shù)據(jù),用藥物的峰面積對(duì)內(nèi)標(biāo)的峰面積之比vs藥物濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后計(jì)算其線性范圍等等。 兩種方法的不同之處就是做標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)候,需不需要將標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)加到基質(zhì)中,然后采集數(shù)據(jù),做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 請(qǐng)問這兩種方法有什么不同?那一種更好?通常用的是哪種方法? 謝謝! [ Last edited by gruyclewee on 2013-12-3 at 11:17 ] |

實(shí)習(xí)版主 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗(yàn): +1209 |
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1、在常規(guī)實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)該使用基質(zhì)去配制標(biāo)準(zhǔn)曲線,國外好多文獻(xiàn)都是用基質(zhì)去配的,不管加入內(nèi)標(biāo)是克服基質(zhì)效應(yīng)也罷,還是跟蹤回收率問題也罷,個(gè)人認(rèn)為基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)更能真實(shí)的反應(yīng)樣品與儀器,與標(biāo)準(zhǔn)之間的關(guān)系。 2、好多中文文獻(xiàn)均使用標(biāo)準(zhǔn)溶液去繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,個(gè)人認(rèn)為這是儀器的標(biāo)準(zhǔn)曲線,反應(yīng)的是標(biāo)準(zhǔn)與儀器間的線性范圍,而與樣品關(guān)系不大。這個(gè)不推薦。如果解釋不清楚的話,可以參考儀器精密度和方法精密度之間的關(guān)系和差別。亂說一通,如有問題,請(qǐng)別見笑。 |
鐵桿木蟲 (知名作家)

榮譽(yù)版主 (文壇精英)

鐵桿木蟲 (知名作家)

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