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[交流] HPLC樣品溶劑選擇

揮發(fā)油中組分鑒定與百分含量測定中，用甲醇-乙酸乙酯（1:1）溶解的樣品，但流動相用的是乙腈-水梯度洗脫，不知道這樣的鑒定結(jié)果是否可信。。。如果可信，做百分含量測定的話，直接扣除溶劑峰面積百分比就可以嗎？
PS：測定波長220nm，4min之前出現(xiàn)了很強的溶劑峰，要檢測的物質(zhì)的保留時間在6min以后

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1樓 2013-12-08 18:10:04

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yjlrx

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乙酸乙酯是出峰的，截止波長256，如果面積歸一化法是不是要先算一下各個組分的相對相應(yīng)因子，否則誤差有點大吧？

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2樓2013-12-08 21:53:20

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我沒有看懂樓主發(fā)問的主題和具體描述之間的關(guān)系。

針對主題，溶劑的選擇要求，說點不成熟的經(jīng)驗：
1、能夠溶解待測物質(zhì)
2、不影響待測物質(zhì)檢測
3、能夠在一定時間范圍內(nèi)保持待測物質(zhì)穩(wěn)定

百分含量，那就是面積歸一化，這里主要是待測物質(zhì)之間的響應(yīng)關(guān)系，除非你能夠證明這些物質(zhì)在一個色譜條件下響應(yīng)因子差不多（具體多少需要實驗數(shù)據(jù)，然后取舍），否則沒有意義。如果樓主繼續(xù)追問，我建議把基礎(chǔ)課本再拿出來翻一翻，把“響應(yīng)因子”這個詞搞懂。

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3樓2013-12-09 12:33:45

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foralove

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揮發(fā)油用液相做？會不會GC更適合？

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4樓2013-12-09 21:19:50

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foralove

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鑒定沒問題，保留時間定性，百分含量的話，你所說的應(yīng)該是面積歸一化法，這個只有各組分在檢測器的響應(yīng)因子接近才可以，否則誤差很大。不知道揮發(fā)油組分多嗎？組分不多、能買到標(biāo)樣的話，建議用外標(biāo)法（或者內(nèi)加法）分別定量

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5樓2013-12-09 21:27:29

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2樓: Originally posted by yjlrx at 2013-12-08 21:53:20
乙酸乙酯是出峰的，截止波長256，如果面積歸一化法是不是要先算一下各個組分的相對相應(yīng)因子，否則誤差有點大吧？

恩恩，只是粗略測定幾個主成分的含量

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6樓2013-12-10 19:30:02

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3樓: Originally posted by 張鑫1982 at 2013-12-09 12:33:45
我沒有看懂樓主發(fā)問的主題和具體描述之間的關(guān)系。

針對主題，溶劑的選擇要求，說點不成熟的經(jīng)驗：
1、能夠溶解待測物質(zhì)
2、不影響待測物質(zhì)檢測
3、能夠在一定時間范圍內(nèi)保持待測物質(zhì)穩(wěn)定

百分含量，那就是 ...

謝謝！

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7樓2013-12-10 19:30:37

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senoya

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溶劑影響很小，因為你的進樣量很小，對色譜影響不大。如果不放心的話可以用B相溶解物質(zhì)進行比對。定量的話需要加入內(nèi)標(biāo)，用相對峰面積的比值進行定量。

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8樓2014-01-16 10:18:00

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