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574759350鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
pet-28b載體lacI缺失兩個堿基會導致什么結果
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| 在用pet-28b載體和BL21（DE3）宿主菌構建工程菌之后，測序發(fā)現pet-28b質粒上lacI基因缺失了兩個堿基，這與我的目的蛋白不表達有關系么？ |
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574759350
鐵蟲 (小有名氣)
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3樓2013-12-09 12:16:16
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
574759350: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-12-09 16:56:08
574759350: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-12-09 16:56:08
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更正我上面錯誤的說法， 表達菌株BL21(DE3)上帶有l(wèi)acI基因，其表達的LacI蛋白在非誘導的條件下，既可以與T7 RNA polymerase前的lac UV5啟動子后的operator O結合，也可以與pET28a載體T7啟動子后的Operator O結合，從而在非誘導情況下阻遏目的基因表達 雖然pET-28a載體的LacI發(fā)生堿基缺失突變，由于細菌基因組本身仍能表達正常的LacI，所以總的來說在非誘導情況下仍能阻遏蛋白表達 這兩個堿基的缺失與你的蛋白不表達無關 |
5樓2013-12-09 14:35:21
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