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[求助]
懇請(qǐng)各位幫我分析連接體系是否有問題 已有3人參與
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各位蟲友大家晚上好！ 最近一直載體自連，很是著急，發(fā)帖向各位求助，萬分感激！ 我的連接體系如下： Solution 5 u, pMD 19-T 1 u, DNA 0.65 u, 補(bǔ)足水至10 u 結(jié)果載體自連相當(dāng)嚴(yán)重。 我計(jì)算載體與插入片段依據(jù)如下（插入片段700 bp,150 ng/u）： 1u載體為0.03pm，載體：插入DNA摩爾比1:2—1:10均可，即插入片段為0.06—0.3pm,按照插入片段使用量（ng）=nmol數(shù)*660*插入片段bp數(shù)，得出使用量為28ng—138ng,換算成體積是0.187—0.92ul，連接體系中我加0.65uDNA應(yīng)該是沒問題的，請(qǐng)蟲友幫我分析分析，為何這么多載體自連，謝謝各位了！ |
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2樓2013-12-11 22:43:55
3樓2013-12-11 22:48:15
夢(mèng)里沙漠
金蟲 (小有名氣)
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4樓2013-12-12 11:14:54
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7樓2013-12-12 16:03:50
262734003
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8樓2013-12-13 09:05:36
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