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1056336909銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于DNA堿基配對反應的條件 已有2人參與
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| 有沒有哪位大神知道單鏈DNA通過堿基配對反應形成雙鏈的實驗條件,比如溫度、時間、緩沖液等,最好提供一些資料,感激不盡。PS:最好再提供一下雙鏈DNA解鏈時的實驗條件,thanks again. |


銀蟲 (小有名氣)

至尊木蟲 (文壇精英)
銀蟲 (小有名氣)

至尊木蟲 (文壇精英)
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單鏈DNA是否自身配對,取決于其堿基序列和長度。如果單鏈DNA序列里有互補的區(qū)間,并且長度也可以容忍其自身配對所產(chǎn)生的張力,就會發(fā)生自配對。比如舉個粗糙的例子,AAGGCCTTNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNAAGGCCTT,兩端可能就會發(fā)生配對。 之所以要先加熱到95度,就是希望單鏈DNA自身的氫鍵,離子鍵等等全部被打破,繼而在緩慢降溫的情況下,與另一單鏈DNA形成雙鏈DNA,降溫過程一定要緩慢,嚴禁冷激,否則會發(fā)生非特異性的配對。所以通常用單鏈DNA制備雙鏈DNA時,保險起見,加熱到95度這個過程是不省略的,至少我看到的文獻都是如此,而且這個過程也并不繁瑣,有個加熱塊就行了,沒必要省略。 |
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