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小小幺幺新蟲 (初入文壇)
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[求助]
雙熒光結(jié)果求助 已有2人參與
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| 我們組做了質(zhì)粒和mimics 的共轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)，293A細(xì)胞，12孔板，NC質(zhì)粒+NC mimics 、野生型質(zhì)粒+目的mimics 、突變型質(zhì)粒+目的mimics。結(jié)果野生型雙熒光結(jié)果發(fā)現(xiàn)比值比NC組要高，突變型要比NC組要低，這種結(jié)果正常么？怎么解釋？已經(jīng)重復(fù)了3板，趨勢是一致的，提高質(zhì)粒濃度后也是這樣的結(jié)果，菜鳥求助。 |
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小小幺幺
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【答案】應(yīng)助回帖
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gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流！ 2014-01-05 15:16:33
gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流！ 2014-01-05 15:16:33
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我最近也在做microrna的熒光素酶試驗(yàn) 我是這么理解的，雙熒光素酶的實(shí)驗(yàn)是用來檢測基因3‘utr端與microrna的結(jié)合 你構(gòu)建的reporter質(zhì)粒熒光素基因3’端含有預(yù)測結(jié)合的那一段堿基序列 如果與microrna確實(shí)可以互補(bǔ)，那么熒光素酶被抑制表達(dá) 看一些microrna方面的文獻(xiàn)想必你也發(fā)現(xiàn)，如果確實(shí)有binding，野生型應(yīng)該是熒光減弱，而突變型應(yīng)該有個(gè)rescue，比野生高 你這個(gè)結(jié)果反了 不過難以置信的是，我和你得出了類似的難以解釋的結(jié)果嗎，是反的，而且我已經(jīng)重復(fù)四次。。。 |
5樓2014-01-05 11:23:16
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