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libinaizuqiu新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細(xì)菌抗生素抗性誘導(dǎo) 已有3人參與
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| 我的野生病原細(xì)菌不抗利福平，請(qǐng)問如何誘導(dǎo)我的菌具備利福平抗性呢？求教，謝謝。 |
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zhaozhibozhi
金蟲 (正式寫手)
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2樓2013-12-24 22:08:26
3樓2013-12-27 12:42:53
【答案】應(yīng)助回帖
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什么菌啊？是結(jié)核分枝桿菌嗎？ 如果是，則要注意了，對(duì)結(jié)核分枝桿菌野生株的人工誘導(dǎo)耐藥是有一定社會(huì)潛在危害性的，千萬不要流傳出去，操作者自己也要小心，盡量操作時(shí)注意防護(hù)，操作后污染物處理到位，好像對(duì)這類菌的耐藥誘導(dǎo)研究，WHO是有嚴(yán)格規(guī)定的。 如果是其他常見病原菌，有兩種常用方法誘導(dǎo)，兩種方法一般都需要先測定利福平對(duì)這株菌的MIC值： 1）一步法：用CLSI等提供的這類菌對(duì)利福平的耐藥水平濃度加入到新鮮培養(yǎng)的菌液中直接振蕩培養(yǎng)誘導(dǎo)，培養(yǎng)后將菌液離心濃縮然后涂布在含同樣耐藥水平利福平的瓊脂平板上，前提是菌液體積要大些，保證有足夠總量細(xì)菌，因一般細(xì)菌的自發(fā)突變率在10-7~10-10水平，理論上你初始接種的菌量應(yīng)在10+10cfu水平。篩到的陽性耐藥突變株以后一直用含抗性的平板維持培養(yǎng)。 2）多步法：先用低于MIC濃度利福平培養(yǎng)菌液，然后轉(zhuǎn)種至含MIC水平利福平的培養(yǎng)基中，再轉(zhuǎn)種至更高水平利福平的培養(yǎng)基中，以此類推，逐步提高抗生素濃度，最后再將菌液涂布在高利福平濃度（最好就是耐藥標(biāo)準(zhǔn)的）的瓊脂平板上，如果多次傳代后仍保持這種水平抗性的，就是穩(wěn)定的耐藥突變株了。 |
4樓2013-12-28 00:15:20
b6122
木蟲 (正式寫手)
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5樓2013-12-28 02:50:54
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