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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 細菌抗生素抗性誘導
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[求助]
細菌抗生素抗性誘導 已有3人參與
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| 我的野生病原細菌不抗利福平，請問如何誘導我的菌具備利福平抗性呢？求教，謝謝。 |
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zhaozhibozhi
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2樓2013-12-24 22:08:26
3樓2013-12-27 12:42:53
【答案】應助回帖
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什么菌啊？是結核分枝桿菌嗎？ 如果是，則要注意了，對結核分枝桿菌野生株的人工誘導耐藥是有一定社會潛在危害性的，千萬不要流傳出去，操作者自己也要小心，盡量操作時注意防護，操作后污染物處理到位，好像對這類菌的耐藥誘導研究，WHO是有嚴格規(guī)定的。 如果是其他常見病原菌，有兩種常用方法誘導，兩種方法一般都需要先測定利福平對這株菌的MIC值： 1）一步法：用CLSI等提供的這類菌對利福平的耐藥水平濃度加入到新鮮培養(yǎng)的菌液中直接振蕩培養(yǎng)誘導，培養(yǎng)后將菌液離心濃縮然后涂布在含同樣耐藥水平利福平的瓊脂平板上，前提是菌液體積要大些，保證有足夠總量細菌，因一般細菌的自發(fā)突變率在10-7~10-10水平，理論上你初始接種的菌量應在10+10cfu水平。篩到的陽性耐藥突變株以后一直用含抗性的平板維持培養(yǎng)。 2）多步法：先用低于MIC濃度利福平培養(yǎng)菌液，然后轉種至含MIC水平利福平的培養(yǎng)基中，再轉種至更高水平利福平的培養(yǎng)基中，以此類推，逐步提高抗生素濃度，最后再將菌液涂布在高利福平濃度（最好就是耐藥標準的）的瓊脂平板上，如果多次傳代后仍保持這種水平抗性的，就是穩(wěn)定的耐藥突變株了。 |
4樓2013-12-28 00:15:20
b6122
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5樓2013-12-28 02:50:54
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