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檸檬可樂星新蟲 (小有名氣)
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測序公司采用的測序原理是什么? 已有2人參與
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各位大蝦:知不知道一些測序公司,比如華大、生工、英濰,現(xiàn)在測序一般用的什么技術(shù),原理是什么? 我主要是想搞清楚他們反饋的測序結(jié)果是那條鏈的序列。 比如我是用pMD 19-T載體克隆后送測的,我要求正向測序,結(jié)果他們用M13F引物測的,那么得到的序列是正義鏈還是反義鏈呢? |

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1、你的目的片段和PMD-19T載體連接是不定向的 2、測序公司所說的正向和反向是針對載體(如PMD-19T)來說的 3、對于PMD-19T來說,M13F引物所在的那條鏈即為所謂的正向(正義),M13R為反向(反義) 4、因此,如果你不知道你的目的片段的連接方向如何,那么正向測序結(jié)果既也有可能測出你的目的片段是正向也有可能是反向 5、可以用M13F和你的目的片段的反向引物跑PCR檢測,如果能跑出片段則為正向連接,如果M13F和你的目的片段正向引物能跑出來,則為反向連接; |
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