 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1144 | 回復(fù): 5 | |||
莊___木蟲 (初入文壇)
|
[求助]
真核生物的基因構(gòu)建 已有3人參與
|
| 請問能將一個質(zhì)粒直接導(dǎo)入真菌中表達(dá)，而不是線性化后導(dǎo)入嗎，直接導(dǎo)入會不會發(fā)生丟失，如果是要線性化導(dǎo)入的話，在18SrDNA處發(fā)生同源重組的話是不是會破壞18SrDNA的表達(dá)，使得真核生物不能生長? |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 有用 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有217人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 關(guān)于真核生物mRNA與基因組
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 真菌的基因克隆與表達(dá) 為什么要去除內(nèi)含子？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 基因工程課程小結(jié)
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 關(guān)于基因構(gòu)建中開放閱讀框架的若干問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 連有啟動子、基因、終止子的一整段叫什么
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 真核生物的啟動子和原核生物的啟動子的結(jié)構(gòu)有什么區(qū)別？
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 建基因文庫是為什么？弱弱的問一下，新手
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 真核生物基因在大腸中表達(dá) 問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】真核基因在原核生物表達(dá)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】如何構(gòu)建細(xì)菌的基因組表達(dá)文庫
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】怎樣將真核生物的基因在原核生物中表達(dá)？
已經(jīng)有3人回復(fù)
水水613
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1033.1
- 帖子: 44
- 在線: 61.1小時
- 蟲號: 1626175
- 注冊: 2012-02-19
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
2樓2013-12-30 16:20:27
luwei13566
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 184 (高中生)
- 金幣: 4351.4
- 散金: 97
- 紅花: 35
- 帖子: 641
- 在線: 261.1小時
- 蟲號: 2380655
- 注冊: 2013-03-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵交流！ 2013-12-30 18:11:10
gyesang: 回帖置頂 2013-12-30 18:11:11
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵交流！ 2013-12-30 18:11:10
gyesang: 回帖置頂 2013-12-30 18:11:11
|
一般pPIC系列基本都是在5‘AOX1處和HIS4處重組，當(dāng)然你的基因如果和酵母的基因組存在同源區(qū)段自然就會有其他區(qū)段的重組。 其實線性化并不是發(fā)生同源重組的必須條件，直接把環(huán)狀質(zhì)粒導(dǎo)入酵母也會發(fā)生重組，但是是隨機(jī)重組，也就是說質(zhì)粒上所有和酵母同源區(qū)段都會有發(fā)生重組的可能，而線性化只不過利用是通過內(nèi)切酶切出了同源臂，而同源臂比其他區(qū)段相比更容易與酵母基因組上的相關(guān)區(qū)域發(fā)生單交換或者雙交換事件~從而與酵母特定的區(qū)域發(fā)生重組。 如果你的質(zhì)粒圖譜上沒有在酵母中穩(wěn)定復(fù)制的復(fù)制起始位點的話，質(zhì)粒自然不會單獨傳代，如果整合不上基因組就會隨著酵母不斷的擴(kuò)增而丟失 你的質(zhì)粒是什么質(zhì)粒？是商品化的還是自己構(gòu)建的？18SrDNA及其周圍都屬于菌株十分保守的區(qū)域，至少我沒用過在18SrDNA整合的質(zhì)粒~~~ |
3樓2013-12-30 16:35:36
莊___
木蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 4157
- 帖子: 17
- 在線: 19.9小時
- 蟲號: 1694922
- 注冊: 2012-03-16
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
4樓2013-12-30 18:31:11
luwei13566
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 184 (高中生)
- 金幣: 4351.4
- 散金: 97
- 紅花: 35
- 帖子: 641
- 在線: 261.1小時
- 蟲號: 2380655
- 注冊: 2013-03-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金幣+2, 鼓勵交流！ 2013-12-31 00:43:54
莊___: 金幣+18, ★★★很有幫助, 嗯，灰常感謝 2013-12-31 10:30:01
gyesang: 金幣+2, 鼓勵交流！ 2013-12-31 00:43:54
莊___: 金幣+18, ★★★很有幫助, 嗯，灰常感謝 2013-12-31 10:30:01
|
額，你真厲害，~~這個我做不來~~，要接這個題首先你肯定對裂殖壺菌的代謝和整個基因圖譜非常清楚吧~~ 至于合適地方的選擇，我覺得首先你構(gòu)建質(zhì)粒在宿主菌的特定位置上整合以后不能影響宿主菌最基本的代謝~不然宿主菌就沒法長了。是不是可以在主要代謝以外的一些代謝分支上找一找看有沒有大小合適而且在基因組上拷貝數(shù)不低的一些酶的基因來設(shè)計同源臂？就好比畢赤酵母的AOX1一樣，整合上去不影響平常的代謝，只是在甲醇誘導(dǎo)的時候起效果~~ 其次，選擇的整合位點對你以后陽性轉(zhuǎn)化子的篩選有益~~比如說把宿主菌原有的同源區(qū)段替換后，宿主菌就出現(xiàn)了明顯的差異，可以通過這個差異來進(jìn)行篩選，就好比pPIC9K的組氨酸利用缺陷型篩選，和Mut+與MutS篩選一樣~~~ 建議你把pPIC系列的質(zhì)粒多研究研究，特別是這些質(zhì)粒線性化位點的選擇，肯定有幫助~~而且一定要多看看裂殖壺菌報道的文獻(xiàn)，絕對有用！~ 畢竟我沒做過，只能說說我自己的想法，希望對你有幫助~~  |
5樓2013-12-30 21:45:31
lglgl
金蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 613
- 散金: 10
- 帖子: 28
- 在線: 26.8小時
- 蟲號: 1915280
- 注冊: 2012-07-29
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
6樓2013-12-30 22:52:50
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 莊___ 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +3 | YNRYG 2026-03-21 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +5 | vv迷 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +12 | 申子申申 2026-03-19 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +6 | 上岸6666@ 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +5 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
[考研] 尋找調(diào)劑 +4 | 倔強(qiáng)芒? 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +7 | Tyoumou 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考博] 招收博士1-2人 +3 | QGZDSYS 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 286分人工智能專業(yè)請求調(diào)劑愿意跨考！ +4 | lemonzzn 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 妮妮ninicgb 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 勇敢的小吳 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +5 | rmc8866 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 306求0703調(diào)劑一志愿華中師范 +5 | 紙魚ly 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | ydfyh 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +16 | 于海海海海 2026-03-19 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 350求調(diào)劑 +5 | weudhdk 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 文思客 2026-03-16 | 7/350 |
|