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如何提取細(xì)胞中的線粒體? 已有4人參與
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求助細(xì)胞中線粒體的提取方法。查了下資料,看到好幾種說(shuō)法: ①直接套用組織中線粒體的提取方法:胰酶消化后得細(xì)胞,加入分離介質(zhì)(250mM蔗糖,1mM EDTA,10mM tris-Hcl),于勻漿器中制成勻漿,在4℃離心機(jī)中1000g 離心10min后,棄沉淀,收集上清;再以12000g離心,15min后棄上清,收集沉淀,用分離介質(zhì)將沉淀懸浮,重復(fù)12000g離心,15min后收集沉淀得到線粒體。 ②細(xì)胞棄去培養(yǎng)液后,用細(xì)胞收集液作用2到3分鐘,用scraper,將細(xì)胞收集起來(lái),6000g,離心15分鐘。棄上清,之后加細(xì)胞勻漿液,用勻漿器或手動(dòng)勻漿管勻漿,之后按要求離心。 那么請(qǐng)問(wèn)細(xì)胞收集液指的是什么?細(xì)胞勻漿液指的是什么? ③超聲提取 這個(gè)可以嗎? |
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