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wyysunshine木蟲 (知名作家)
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[求助]
引物二聚體與目的條帶一樣亮，怎么破？ 已有1人參與
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要擴(kuò)增的目的條帶600 bp，目前程序：94度4min，94度30s，58度1min，72度1min，37個(gè)循環(huán)，72度10min，用于測序~~ 調(diào)了不同的退火溫度、時(shí)間，延伸時(shí)間等（退火59度擴(kuò)出來很弱），現(xiàn)在擴(kuò)出來的目的條帶較好，但同時(shí)引物二聚體也很亮，甚至比目的條帶還要亮！偶爾還有弱的雜帶。。。 已試過延長退火時(shí)間，但擴(kuò)增效果不好。不知道還有神馬方法可以降低引物二聚體的，真希望目的條帶能有引2那么亮就好了！��！ 附圖1張，請大神們支支招~~用于測序    未命名.jpg |
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不葉玨
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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2樓2014-01-06 23:56:11
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