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Probiotics木蟲 (正式寫手)
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TRIzol提取細胞總RNA，為何只有處理組沒有結(jié)果？ 已有1人參與
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最近一直在用Invitrogen公司的TRIzol提取細胞的總RNA，在跑電泳時，空白對照出現(xiàn)了3條亮帶，其中28S的是18S的兩倍寬，亮度清晰。而我的兩個處理組只是在5S的位置有很淺的彌散帶。不知怎么回事？ 1、采用的6孔板培養(yǎng)貼壁細胞，6孔板接種的細胞量都是相同的，一個細胞培養(yǎng)瓶里面出來的。2個孔用1mL TRIzol處理，獲得1個空白對照管，2個處理管。 2、3個管RNA提取條件完全相同，同時做的。 3、在用異丙醇沉淀后，對照管明顯能看出有沉淀，而2個處理管底部沉淀很難看出，即便是有的話也非常少。 提了幾次RNA了，都出現(xiàn)了3中說的情況，對照沉淀多，處理組沉淀少或看不到的情況，這是為什么呢？ 電泳圖如下： 第1張圖是之前提的結(jié)果，左邊的為空白對照，右邊的是處理組，圖中可知，RNA都出現(xiàn)明顯降解，處理組更為嚴重。 有人建議提高細胞濃度試試，第2張圖是剛剛提的結(jié)果，在細胞濃度上有所提高。第1泳道為空白對照，2、3泳道分別是處理組1和2。 對照組和處理組為何出現(xiàn)如此差異？ 煩請高人指點�。�！多謝啦�。�！ Y3[MZEP)F%U~1EF9]6Z$4G1.jpg )Q~R57%X%QM3MDVWJM33{H6.jpg [ Last edited by Probiotics on 2014-1-7 at 21:24 ] |
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張志鴻
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