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曾經(jīng)走過金蟲 (初入文壇)
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[求助]
用實(shí)驗區(qū)分mRNA 和ncRNA
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| 如題：：在研究中發(fā)現(xiàn)一個新的哺乳動物細(xì)胞中的長RNA分子，設(shè)計實(shí)驗研究它是編碼蛋白質(zhì)的mRNA、還是非編碼RNA。 |
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新蟲 (初入文壇)
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2樓2014-07-31 09:20:52
曾經(jīng)走過
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- 專業(yè): 植物生理與生化
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驗證是mRNA還是ncRNA：真核生物中的mRNA有明顯的特征序列，即5’帽子（m7G）和3’Poly（A）尾巴。而哺乳動物mRNA的3’端有20-30個腺苷酸組成的Poly（A）尾，可以作為鑒別mRNA的標(biāo)志。 具體方法：首先合成15-20的聚dT和聚dA——>先進(jìn)行聚dT的單引物PCR，經(jīng)過5-10個循環(huán)——>加入聚dA繼續(xù)進(jìn)行PCR，經(jīng)過25個循環(huán)——>結(jié)束后，進(jìn)行電泳。如果得到了相應(yīng)的擴(kuò)增條帶，說明此核苷酸序列是mRNA；反之，則為非編碼RNA。 |
3樓2014-08-06 11:33:50
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