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分光光度計(jì)參比、空白參比的問(wèn)題。 已有4人參與
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我們分光光度計(jì)是那種放兩個(gè)比色皿，一個(gè)一直不動(dòng)作為參比，另一個(gè)用來(lái)測(cè)水樣。 我測(cè)TN\TP的時(shí)候，都是用純水較零，然后測(cè)空白樣、水樣、最后結(jié)果用水樣減去空白樣。 現(xiàn)在測(cè)葉綠素A，我還是先用純水較零，然后測(cè)90%丙酮（也就是空白樣），水樣，最后用水樣減去空白樣。但是別人告訴我不應(yīng)該這樣。應(yīng)該直接用90%丙酮較零，然后讀取各水樣就是應(yīng)得的值。 我現(xiàn)在很疑惑，到底哪種正確，如果是直接用90%丙酮較零，為什么TN\TP不能直接用空白樣較零呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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stormxuhao: 金幣+2, 積極回復(fù) 2014-01-24 11:44:06
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應(yīng)該是這樣的，你用純水做參比就用純水校零，用空白樣做參比就用空白樣校零，試驗(yàn)步驟是你把參比樣放進(jìn)去以后再按校零按鍵，這樣出來(lái)的數(shù)據(jù)就是你的水樣的數(shù)據(jù)，按你的操作做的話試驗(yàn)誤差還是蠻大的，因?yàn)榉止夤舛葦?shù)據(jù)本來(lái)就很精確，每次測(cè)量都要校零，我一直在用分光光度法做標(biāo)準(zhǔn)曲線，發(fā)現(xiàn)用純水做參比做出來(lái)的方程測(cè)水樣也用純水做參比得出的結(jié)果和用空白樣做出來(lái)的方程測(cè)水樣的時(shí)候也是用空白樣得出來(lái)的結(jié)果差別不大，所以你只要測(cè)量的時(shí)候統(tǒng)一就行了，個(gè)人覺(jué)得空白樣太麻煩。 還要提醒你的就是用分光光度做實(shí)驗(yàn)就算同一個(gè)水樣也測(cè)不出同樣的值來(lái)，還是多次測(cè)量求平均值得好。希望能幫到你。 |
2樓2014-01-23 09:31:13
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我現(xiàn)在有點(diǎn)混亂，就說(shuō)測(cè)TN吧，做標(biāo)線的時(shí)候，我用純水參比調(diào)零，得到標(biāo)液濃度從0到8的不同的吸光度值，然后我就用這些值畫(huà)標(biāo)線，是一條沒(méi)經(jīng)過(guò)原點(diǎn)的線即標(biāo)線。 之后我測(cè)水樣的時(shí)候也用純水做的參比調(diào)零，然后測(cè)得空白樣和各個(gè)水樣的吸光度。之后我把吸光度帶入那條標(biāo)線得到各個(gè)濃度，最后用各水樣濃度減去空白樣濃度就得到我測(cè)得的值。 我感覺(jué)這樣好像不太對(duì)��？請(qǐng)高手繼續(xù)指點(diǎn)��！ |
3樓2014-01-23 15:00:43
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4樓2014-01-24 10:13:18
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5樓2014-01-24 18:11:53
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6樓2014-01-26 08:47:02
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【答案】應(yīng)助回帖
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分光光度法水質(zhì)TN的測(cè)定 美析（中國(guó)）儀器有限公司 堿性過(guò)硫酸鉀消解紫外分光光度法GB 11894－89 1 原理 在60℃以上水溶液中，過(guò)硫酸鉀可分解產(chǎn)生硫酸氫鉀和原子態(tài)氧，硫酸氫鉀在溶液中離解而產(chǎn)生氫離子，故在氫氧化鈉的堿性介質(zhì)中可促使分解過(guò)程趨于完全。 分解出的原子態(tài)氧在120～124℃條件下，可使水樣中含氮化合物的氮元素轉(zhuǎn)化為硝酸鹽。并且在此過(guò)程中有機(jī)物同時(shí)被氧化分解�？捎米贤夥止夤舛确ㄓ诓ㄩL(zhǎng)220和275nm處，分別測(cè)出吸光度A220及A275按式(1)求出校正吸光度A： A＝A220－2A275……(1) 按A的值查校準(zhǔn)曲線并計(jì)算總氮(以NO3-－N計(jì))含量。 2儀器 2.1 美析儀器UV-1100紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)一臺(tái)、10mm石英比色皿一對(duì) 2.2 民用壓力鍋、電爐板各1個(gè) 2.3 25ml具塞玻璃磨口比色管15個(gè)（13用2備） 2.4分析天平及稱(chēng)量紙 2.5 漏斗及中速濾紙 2.6 1000ml容量瓶2個(gè)、100ml容量瓶1個(gè) 2.7 100ml燒杯4個(gè)（3用1備）及玻璃棒 2.8 100ml滴瓶1個(gè)、100ml塑料試劑瓶1個(gè) 2.9 0.5ml、2ml、5ml、10ml移液管1根、1ml移液管2根、洗耳球（大小各1個(gè)） 3 試劑和材料 除非另有說(shuō)明外，分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)I(yè)標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?br /> 3.1無(wú)氨水 蒸餾法：在1000mL蒸餾水中，加入0.10mL硫酸(p=1.84g/mL)。并在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去前50mL餾出液，然后將餾出液收集在帶有玻璃塞的玻璃瓶中。 3 .2氫氧化鈉溶液，200g/L：稱(chēng)取20mL氫氧化鈉(NaOH)，溶于水(3.1)中，稀釋至100mL。 3.3 氫氧化鈉溶液，20g/L：將(3.2)溶液稀釋10倍而得。 3.4 堿性過(guò)硫酸鉀溶液：稱(chēng)取40g過(guò)硫酸鉀(K2S2O8)，另稱(chēng)取15g氫氧化鈉(NaOH)，溶于水(4.1)中，稀釋至1000mL，溶液存放在聚乙烯瓶?jī)?nèi)，最長(zhǎng)可貯存一周。 3.5 鹽酸溶液，1＋9。 3.6 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。 3.6.1 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液，C(KNO3)＝100mg/L：硝酸鉀(KNO3)在105～110℃烘箱中干燥3h，在干燥器中冷卻后，稱(chēng)取0.7218g，溶于水中，移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線在0～10℃暗處保存，或加入1～2mL三氯甲烷保存，可穩(wěn)定6個(gè)月。 3.6.2 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液，C(KNO3)＝10mg/L：將貯備液用水稀釋10倍而得。使用時(shí)配制。 3.7 硫酸溶液，1＋35。 4 步驟 4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 （1）分別吸取0mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、5.00 mL mL、7.00 mL、8.00 mL硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用溶液于25 mL比色管中，用無(wú)氨水稀釋至10 mL標(biāo)線。 （2）加入5 mL堿性過(guò)硫酸鉀溶液，塞緊磨口塞，用紗布及紗繩裹緊管塞，以防止濺出。 （3）將比色管至于壓力蒸汽消毒器中，使比色管在過(guò)熱水蒸氣中加熱0.5h。 （4）自然冷卻，開(kāi)閥放氣，移去外蓋，取出比色管并冷至室溫。 （5）加入（1+9）鹽酸1ml，用蒸餾水稀釋至25ml標(biāo)線。 （6）.在紫外分光光度計(jì)上，以零號(hào)管溶液作參比，用10mm 石英比色皿分別在220nm及275nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。 （7）用校正的吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 4.2 樣品測(cè)定步驟 取10mL水樣，或去適量水樣（使氮含量為20-80ug），按校準(zhǔn)曲線繪制步驟(2)-（6）操作。按校正曲線，在校準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的總氮量。 5 計(jì)算 總氮（mg/L）=m/v 式中，m為從校準(zhǔn)曲線上查的量，ug V為所取水樣體積，mL。 |
7樓2014-07-17 18:31:35
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10樓2016-08-23 19:15:12
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