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花街小小新蟲 (初入文壇)
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[求助]
分光光度計參比、空白參比的問題。 已有4人參與
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我們分光光度計是那種放兩個比色皿，一個一直不動作為參比，另一個用來測水樣。 我測TN\TP的時候，都是用純水較零，然后測空白樣、水樣、最后結果用水樣減去空白樣。 現(xiàn)在測葉綠素A，我還是先用純水較零，然后測90%丙酮（也就是空白樣），水樣，最后用水樣減去空白樣。但是別人告訴我不應該這樣。應該直接用90%丙酮較零，然后讀取各水樣就是應得的值。 我現(xiàn)在很疑惑，到底哪種正確，如果是直接用90%丙酮較零，為什么TN\TP不能直接用空白樣較零呢？ |
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應該是這樣的，你用純水做參比就用純水校零，用空白樣做參比就用空白樣校零，試驗步驟是你把參比樣放進去以后再按校零按鍵，這樣出來的數(shù)據(jù)就是你的水樣的數(shù)據(jù)，按你的操作做的話試驗誤差還是蠻大的，因為分光光度數(shù)據(jù)本來就很精確，每次測量都要校零，我一直在用分光光度法做標準曲線，發(fā)現(xiàn)用純水做參比做出來的方程測水樣也用純水做參比得出的結果和用空白樣做出來的方程測水樣的時候也是用空白樣得出來的結果差別不大，所以你只要測量的時候統(tǒng)一就行了，個人覺得空白樣太麻煩。 還要提醒你的就是用分光光度做實驗就算同一個水樣也測不出同樣的值來，還是多次測量求平均值得好。希望能幫到你。 |
2樓2014-01-23 09:31:13
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5樓2014-01-24 18:11:53
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6樓2014-01-26 08:47:02
【答案】應助回帖
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分光光度法水質(zhì)TN的測定 美析（中國）儀器有限公司 堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法GB 11894－89 1 原理 在60℃以上水溶液中，過硫酸鉀可分解產(chǎn)生硫酸氫鉀和原子態(tài)氧，硫酸氫鉀在溶液中離解而產(chǎn)生氫離子，故在氫氧化鈉的堿性介質(zhì)中可促使分解過程趨于完全。 分解出的原子態(tài)氧在120～124℃條件下，可使水樣中含氮化合物的氮元素轉(zhuǎn)化為硝酸鹽。并且在此過程中有機物同時被氧化分解�？捎米贤夥止夤舛确ㄓ诓ㄩL220和275nm處，分別測出吸光度A220及A275按式(1)求出校正吸光度A： A＝A220－2A275……(1) 按A的值查校準曲線并計算總氮(以NO3-－N計)含量。 2儀器 2.1 美析儀器UV-1100紫外可見分光光度計一臺、10mm石英比色皿一對 2.2 民用壓力鍋、電爐板各1個 2.3 25ml具塞玻璃磨口比色管15個（13用2備） 2.4分析天平及稱量紙 2.5 漏斗及中速濾紙 2.6 1000ml容量瓶2個、100ml容量瓶1個 2.7 100ml燒杯4個（3用1備）及玻璃棒 2.8 100ml滴瓶1個、100ml塑料試劑瓶1個 2.9 0.5ml、2ml、5ml、10ml移液管1根、1ml移液管2根、洗耳球（大小各1個） 3 試劑和材料 除非另有說明外，分析時均使用符合國家標準或?qū)I(yè)標準的分析純試劑。 3.1無氨水 蒸餾法：在1000mL蒸餾水中，加入0.10mL硫酸(p=1.84g/mL)。并在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去前50mL餾出液，然后將餾出液收集在帶有玻璃塞的玻璃瓶中。 3 .2氫氧化鈉溶液，200g/L：稱取20mL氫氧化鈉(NaOH)，溶于水(3.1)中，稀釋至100mL。 3.3 氫氧化鈉溶液，20g/L：將(3.2)溶液稀釋10倍而得。 3.4 堿性過硫酸鉀溶液：稱取40g過硫酸鉀(K2S2O8)，另稱取15g氫氧化鈉(NaOH)，溶于水(4.1)中，稀釋至1000mL，溶液存放在聚乙烯瓶內(nèi)，最長可貯存一周。 3.5 鹽酸溶液，1＋9。 3.6 硝酸鉀標準溶液。 3.6.1 硝酸鉀標準貯備液，C(KNO3)＝100mg/L：硝酸鉀(KNO3)在105～110℃烘箱中干燥3h，在干燥器中冷卻后，稱取0.7218g，溶于水中，移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至標線在0～10℃暗處保存，或加入1～2mL三氯甲烷保存，可穩(wěn)定6個月。 3.6.2 硝酸鉀標準使用液，C(KNO3)＝10mg/L：將貯備液用水稀釋10倍而得。使用時配制。 3.7 硫酸溶液，1＋35。 4 步驟 4.1 標準曲線的繪制 （1）分別吸取0mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、5.00 mL mL、7.00 mL、8.00 mL硝酸鉀標準使用溶液于25 mL比色管中，用無氨水稀釋至10 mL標線。 （2）加入5 mL堿性過硫酸鉀溶液，塞緊磨口塞，用紗布及紗繩裹緊管塞，以防止濺出。 （3）將比色管至于壓力蒸汽消毒器中，使比色管在過熱水蒸氣中加熱0.5h。 （4）自然冷卻，開閥放氣，移去外蓋，取出比色管并冷至室溫。 （5）加入（1+9）鹽酸1ml，用蒸餾水稀釋至25ml標線。 （6）.在紫外分光光度計上，以零號管溶液作參比，用10mm 石英比色皿分別在220nm及275nm波長處測定吸光度。 （7）用校正的吸光度繪制標準曲線。 4.2 樣品測定步驟 取10mL水樣，或去適量水樣（使氮含量為20-80ug），按校準曲線繪制步驟(2)-（6）操作。按校正曲線，在校準曲線上查出相應的總氮量。 5 計算 總氮（mg/L）=m/v 式中，m為從校準曲線上查的量，ug V為所取水樣體積，mL。 |
7樓2014-07-17 18:31:35
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