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落落_無塵金蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助，買細(xì)胞需要買配套培養(yǎng)基嗎
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| 想請(qǐng)教一下有經(jīng)驗(yàn)的蟲友，在ATCC買細(xì)胞需要買配套的培養(yǎng)基和血清嗎？上面賣的和平時(shí)實(shí)驗(yàn)室用的不一樣，難道以后都得買ATCC的嗎？ |
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落落_無塵
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lywinan
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
落落_無塵: 金幣+15, ★★★很有幫助 2014-02-17 14:45:44
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| 寄來的細(xì)胞應(yīng)該是一個(gè)方瓶，細(xì)胞貼壁，里面灌滿培養(yǎng)基的狀態(tài)，LZ可以在無菌條件下將里面的大部分培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移出來保存，留一小部分（一般培養(yǎng)用的量）將瓶放入二氧化碳培養(yǎng)箱讓細(xì)胞恢復(fù)一下，而后用寄送用的培養(yǎng)基添加DMSO凍存原始株，凍存過程中留一小部分細(xì)胞在方瓶或孔板中繼續(xù)傳代培養(yǎng)，可以參照ATCC的說明使用培養(yǎng)基，自己準(zhǔn)備的培養(yǎng)基里面開始添加一些寄送用的培養(yǎng)基混合使用，而后根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況逐漸減少原始培養(yǎng)基的使用比例，其實(shí)，個(gè)人認(rèn)為，MEM、DMEM、DMEM/F12或1640等培養(yǎng)基基本可以滿足大部分細(xì)胞的初期生長(zhǎng)，關(guān)鍵是添加血清，初期可以使用好的胎牛血清，發(fā)狠添加15%-20%，還有長(zhǎng)不好的么？還長(zhǎng)不好，就要懷疑染菌或支原體嘍。。。祝你好運(yùn)！ |
4樓2014-02-17 14:34:23
落落_無塵
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5樓2014-02-17 14:46:48
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