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落落_無(wú)塵金蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助，買(mǎi)細(xì)胞需要買(mǎi)配套培養(yǎng)基嗎
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| 想請(qǐng)教一下有經(jīng)驗(yàn)的蟲(chóng)友，在ATCC買(mǎi)細(xì)胞需要買(mǎi)配套的培養(yǎng)基和血清嗎？上面賣(mài)的和平時(shí)實(shí)驗(yàn)室用的不一樣，難道以后都得買(mǎi)ATCC的嗎？ |
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落落_無(wú)塵: 金幣+10, ★★★很有幫助 2014-02-17 14:14:52
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ATCC的細(xì)胞買(mǎi)來(lái)好貴啊，我們這兒雖有些也是ATCC的，但用的是自己配的培養(yǎng)基，買(mǎi)來(lái)粉末的培養(yǎng)基自己配，用時(shí)加上十分之一胎牛血清，還有雙抗。 細(xì)胞一般都長(zhǎng)得不錯(cuò)。建議LZ先保一批，分出幾盤(pán)用自己配的培養(yǎng)基養(yǎng)養(yǎng)看看狀態(tài)再說(shuō)~ |
2樓2014-02-17 14:06:32
落落_無(wú)塵
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lywinan
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 寄來(lái)的細(xì)胞應(yīng)該是一個(gè)方瓶，細(xì)胞貼壁，里面灌滿培養(yǎng)基的狀態(tài)，LZ可以在無(wú)菌條件下將里面的大部分培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移出來(lái)保存，留一小部分（一般培養(yǎng)用的量）將瓶放入二氧化碳培養(yǎng)箱讓細(xì)胞恢復(fù)一下，而后用寄送用的培養(yǎng)基添加DMSO凍存原始株，凍存過(guò)程中留一小部分細(xì)胞在方瓶或孔板中繼續(xù)傳代培養(yǎng)，可以參照ATCC的說(shuō)明使用培養(yǎng)基，自己準(zhǔn)備的培養(yǎng)基里面開(kāi)始添加一些寄送用的培養(yǎng)基混合使用，而后根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況逐漸減少原始培養(yǎng)基的使用比例，其實(shí)，個(gè)人認(rèn)為，MEM、DMEM、DMEM/F12或1640等培養(yǎng)基基本可以滿足大部分細(xì)胞的初期生長(zhǎng)，關(guān)鍵是添加血清，初期可以使用好的胎牛血清，發(fā)狠添加15%-20%，還有長(zhǎng)不好的么？還長(zhǎng)不好，就要懷疑染菌或支原體嘍。。。祝你好運(yùn)！ |
4樓2014-02-17 14:34:23
落落_無(wú)塵
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6樓2014-02-17 15:03:38
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