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[求助]
求助,買細(xì)胞需要買配套培養(yǎng)基嗎
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| 想請教一下有經(jīng)驗的蟲友,在ATCC買細(xì)胞需要買配套的培養(yǎng)基和血清嗎?上面賣的和平時實驗室用的不一樣,難道以后都得買ATCC的嗎? |
捐助貴賓 (職業(yè)作家)
| 寄來的細(xì)胞應(yīng)該是一個方瓶,細(xì)胞貼壁,里面灌滿培養(yǎng)基的狀態(tài),LZ可以在無菌條件下將里面的大部分培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移出來保存,留一小部分(一般培養(yǎng)用的量)將瓶放入二氧化碳培養(yǎng)箱讓細(xì)胞恢復(fù)一下,而后用寄送用的培養(yǎng)基添加DMSO凍存原始株,凍存過程中留一小部分細(xì)胞在方瓶或孔板中繼續(xù)傳代培養(yǎng),可以參照ATCC的說明使用培養(yǎng)基,自己準(zhǔn)備的培養(yǎng)基里面開始添加一些寄送用的培養(yǎng)基混合使用,而后根據(jù)細(xì)胞生長狀況逐漸減少原始培養(yǎng)基的使用比例,其實,個人認(rèn)為,MEM、DMEM、DMEM/F12或1640等培養(yǎng)基基本可以滿足大部分細(xì)胞的初期生長,關(guān)鍵是添加血清,初期可以使用好的胎牛血清,發(fā)狠添加15%-20%,還有長不好的么?還長不好,就要懷疑染菌或支原體嘍。。。祝你好運! |
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