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seamas_gao1銀蟲 (小有名氣)
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求助 中國對蝦IGF-1,IGF-II 基因序列及其多態(tài)性與生長性狀的關(guān)聯(lián)分析 摘要或全文
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禁蟲 (知名作家)
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中國對蝦IGF-Ⅰ,IGF-Ⅱ基因序列及其多態(tài)性與生長性狀的關(guān)聯(lián)分析 基本信息 批準(zhǔn)號30901101 項目名稱中國對蝦IGF-Ⅰ,IGF-Ⅱ基因序列及其多態(tài)性與生長性狀的關(guān)聯(lián)分析 項目類別青年科學(xué)基金項目 申請代碼C190202 項目負(fù)責(zé)人李朝霞 負(fù)責(zé)人職稱副教授 依托單位青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 研究期限2010-01-01 到 2012-12-31 資助經(jīng)費19.0000(萬元) 項目摘要 中文摘要 中國對蝦(Fenneropenaeus chinensis)是黃渤海的主要經(jīng)濟(jì)蝦類,近些年來,由于種質(zhì)、病害和環(huán)境因素的影響,養(yǎng)殖產(chǎn)量急劇下降。培育良種已成為保障中國對蝦養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ),而利用分子標(biāo)記開展重要經(jīng)濟(jì)性狀的基因定位,是分子育種的重要基礎(chǔ)。本項目利用同源克隆獲取對蝦IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ基因的中間片段,通過RACE技術(shù)獲得全長cDNA序列,通過設(shè)計引物,克隆全長DNA序列,分析IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ cDNA和DNA序列特征。選取5個不同地理群體的對蝦,測定中國對蝦體長、頭胸甲長、頭胸甲寬、各腹節(jié)長、各腹節(jié)寬、尾節(jié)長等形態(tài)指標(biāo)及體重等性狀;利用PCR-SSCP方法分析中國對蝦IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ 基因的SNP多態(tài)性,對存在基因型多態(tài)性個體進(jìn)行候選基因測序,明確SNP多態(tài)性類型。分析多態(tài)性SNP位點與中國對蝦經(jīng)濟(jì)性狀之間的關(guān)聯(lián)分析,尋找與生長性狀相關(guān)功能性的SNP標(biāo)記。 中文主題詞中國對蝦;FaMeT;基因克隆;生長性狀;關(guān)聯(lián)分析 英文摘要 英文主題詞Fenneropenaeus chinensis;FaMe;gene cloning;growth character;association analysis 結(jié)題摘要 中國對蝦(Fenneropenaeus chinensis)是黃渤海的主要經(jīng)濟(jì)蝦類,近些年來,由于種質(zhì)、病害和環(huán)境因素的影響,養(yǎng)殖產(chǎn)量急劇下降。培育良種已成為保障中國對蝦養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ),而利用分子標(biāo)記開展重要經(jīng)濟(jì)性狀的基因定位,是分子育種的重要基礎(chǔ)。甲基法尼酯(MF)在結(jié)構(gòu)上和昆蟲的保幼激素JH-III的結(jié)構(gòu)相似,可以調(diào)節(jié)甲殼動物生殖、卵黃發(fā)育、蛻皮、形態(tài)發(fā)生和一般蛋白質(zhì)合成等重要生物過程。甲殼動物中,由FA轉(zhuǎn)變生成MF的限速酶為法尼酸-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(FaMeT),鑒于其在MF形成中的重要作用,F(xiàn)aMeT被認(rèn)為在調(diào)節(jié)甲殼動物包括生長在內(nèi)的許多生理過程中起了重要作用,可作為生長性狀的候選基因。首先,通過RACE的方法獲得中國對蝦PcFaMeT基因全長序列,包含840bp的開放閱讀框,可編碼280個氨基酸(GenBank Accession no:JQ315119)。氨基酸序列比對結(jié)果表明,中國對蝦與其他蝦類的FAMeT序列同源性達(dá)81.07–96.07%。采用熒光定量PCR方法,檢測PcFaMeT基因在的時空表達(dá)特點,結(jié)果表明,PcFaMeT基因在各組織中廣泛分布,其中腹節(jié)肌肉中的表達(dá)量最高;整個蛻皮周期中,PcFaMeT均有表達(dá),但隨著蛻皮周期的進(jìn)行,表達(dá)量也呈周期性變化(P<0.05),在蛻皮間期PcFaMeT的表達(dá)量最高,表明FA轉(zhuǎn)化為MF對于觸發(fā)蛻皮過程的起始是必要的。鑒于該基因與生長的關(guān)系,本試驗進(jìn)行了SNP的檢測及生長性狀的關(guān)聯(lián)分析。研究發(fā)現(xiàn),中國對蝦PcFaMeT基因序列中共有5個單核苷酸多態(tài)性位點,其中,在163bp處發(fā)生轉(zhuǎn)換,堿基A/G,相應(yīng)氨基酸由Ile-Val;在392bp處發(fā)生顛換,堿基G/T,相應(yīng)氨基酸由Gly-Val;708bp處發(fā)生轉(zhuǎn)換,堿基A/G,編碼的氨基酸沒有發(fā)生改變;在752bp處發(fā)生轉(zhuǎn)換,堿基T/C,相應(yīng)氨基酸由Met-Thr;在818bp處發(fā)生轉(zhuǎn)換,堿基C/T,相應(yīng)氨基酸由Thr-Ile。通過等位基因特異PCR(AS-PCR)的分型方法,在中國對蝦日照群體中進(jìn)行基因型檢測,統(tǒng)計分析表明,多態(tài)性位點的基因型在中國對蝦日照群體中的分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),與經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)分析表明,392G/T位點的TT基因型與中國對蝦體重、頭胸甲寬度的相關(guān)性達(dá)到了顯著水平(P<0.05)。 |
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