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元一妄金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于蛋白質(zhì)保存時(shí)間，-80℃保存6個(gè)月做雙向電泳，影響有多大？ 已有1人參與
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| 如題所示，樣品為瘤胃液，未經(jīng)任何處理，取樣后置于液氮中，之后轉(zhuǎn)存于-80℃環(huán)境，如今已過(guò)半年時(shí)間，準(zhǔn)備做雙向電泳，不知會(huì)不會(huì)有不好的影響，都會(huì)有什么影響，謝謝大家了 |
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snoopytbw
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二維電泳做蛋白組的前處理很重要，直接凍肯定不行，蛋白不可逆變型后，等電點(diǎn)和亞基結(jié)構(gòu)都會(huì)改變，你提完蛋白最好用蛋白質(zhì)組用溶解液重懸，超高速離心去碎片和細(xì)胞器。加入蛋白酶抑制劑，分裝凍進(jìn)-80大概能放一年。且最好除下鹽，不然時(shí)間長(zhǎng)了難除的，用丙酮沉淀也好，過(guò)柱子也好，超濾也好。反正我試過(guò)感覺(jué)丙酮效果最好，步驟越少損失越小。做IEF的時(shí)候最好預(yù)實(shí)驗(yàn)下調(diào)下電壓。分的開(kāi)一點(diǎn)。跑sdspage的時(shí)候注意起始電壓。 [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶(hù)端 ] |
6樓2014-09-12 09:47:23
小小武
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2樓2014-02-21 16:17:25
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3樓2014-02-22 17:43:57
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4樓2014-03-20 08:30:10
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