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流式細胞儀測估測四膜蟲基因組大小基因組大小 已有1人參與
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嗜熱四膜蟲有一大核和一小核，大核的體積大約是小核的52倍，基因組大小104M,45個拷貝，小核2個拷貝，基因組不確定。 我最近guava做的時候多半出現(xiàn)2個峰，做的好一點可以出現(xiàn)3個峰。第一個最大的豐基本上確定是細胞碎片，第二個峰是小核，第三個峰是大核。染料是Guava cell cycle reagent,成分含有PI。用大核估測到小核的基因組比預料中的差距很大 。 原因是雜質所占比例太大 ，很難和小核分離開。我想問的問題是：1在破碎細胞的時候，我磨得次數(shù)過多是否會對核有損傷；2有沒有其他的處理方法可以分離小核和雜質；3 PI應該只對細胞核有作用（我做過染料濃度梯度試驗，結果不理想），為什么特異性這么差；4加RNA酶是否必須，室溫放置對核的降解是不是很嚴重（2小時左右）。 如果哪位有guava的使用心得請分享，謝謝！ |
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2樓2014-03-07 10:10:58
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