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chenkai4734新蟲 (初入文壇)
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[交流]
流式細(xì)胞儀測(cè)估測(cè)四膜蟲基因組大小基因組大小 已有1人參與
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嗜熱四膜蟲有一大核和一小核，大核的體積大約是小核的52倍，基因組大小104M,45個(gè)拷貝，小核2個(gè)拷貝，基因組不確定。 我最近guava做的時(shí)候多半出現(xiàn)2個(gè)峰，做的好一點(diǎn)可以出現(xiàn)3個(gè)峰。第一個(gè)最大的豐基本上確定是細(xì)胞碎片，第二個(gè)峰是小核，第三個(gè)峰是大核。染料是Guava cell cycle reagent,成分含有PI。用大核估測(cè)到小核的基因組比預(yù)料中的差距很大 。 原因是雜質(zhì)所占比例太大 ，很難和小核分離開。我想問的問題是：1在破碎細(xì)胞的時(shí)候，我磨得次數(shù)過多是否會(huì)對(duì)核有損傷；2有沒有其他的處理方法可以分離小核和雜質(zhì)；3 PI應(yīng)該只對(duì)細(xì)胞核有作用（我做過染料濃度梯度試驗(yàn)，結(jié)果不理想），為什么特異性這么差；4加RNA酶是否必須，室溫放置對(duì)核的降解是不是很嚴(yán)重（2小時(shí)左右）。 如果哪位有g(shù)uava的使用心得請(qǐng)分享，謝謝！ |
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2樓2014-03-07 10:10:58
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