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[求助]
FAM-miRNA轉(zhuǎn)染小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞觀察不到熒光 已有3人參與
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本人用FAM-miRNA轉(zhuǎn)染mMSCs，轉(zhuǎn)染試劑是用的Invitrogen公司的lipo2000，轉(zhuǎn)染步驟也是按照說明書做的。lipo2000和miRNA孵育的過程用的是不含血清的完全培養(yǎng)基而不是優(yōu)化培養(yǎng)基，但這個影響不大吧？也說可以用不含血清的完全培養(yǎng)基的對吧~接種的細(xì)胞的密度是4萬/孔（24孔板）。孵育了4~5個小時，用熒光顯微鏡觀察，看不到熒光，但是背底的熒光很強(qiáng)。FAM-miRNA是用的公司合成的，應(yīng)該沒問題。想請教一下各位，問題出在哪兒了？再有，想請教一下大家干細(xì)胞轉(zhuǎn)染與其他細(xì)胞轉(zhuǎn)染的一些區(qū)別，因?yàn)榭促Y料干細(xì)胞轉(zhuǎn)染要比其他細(xì)胞類型難一些對吧？謝謝各位啦~~ |
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jurkat.1640
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alxz
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5樓2014-02-25 20:29:22
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