| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2027 | 回復(fù): 7 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖,點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | ||
[求助]
ELISA 不顯色 急急急
|
||
|
哎。。。ELISA這么難嗎?以前的時(shí)候,是空白值太高(0.2左右),現(xiàn)在是所有的孔讀值都在0.09左右(空白孔也是),這是鬧哪樣,哪里都檢查了,不知道是哪一步錯(cuò)了??? 現(xiàn)在我把步驟寫(xiě)下來(lái)了,希望高手解救一次吧!。 采用間接ELISA檢測(cè)抗血清效價(jià)。 用pH 9.6, 0.15 mol.L-1的碳酸鹽緩沖液將純化的重組蛋白稀釋為8、2、0.5μg·mL -1 , 包被酶標(biāo)板, 每孔100μL, 4℃包被過(guò)夜。次日每孔加入100μL 7%的山羊血清封閉液, 37℃封閉2h后, 用PBST洗滌3次。然后每孔加入400、800、1600、3200倍稀釋的羊抗血清100μL, 空白對(duì)照為兔抗血清稀釋液( BSA+PBS) , 37℃孵育1 h后, 同上洗滌3次。再次每孔加入100μL HRP標(biāo)記的羊抗人IgG, 37℃孵育30 min后, 同上洗滌3次。接下來(lái)每孔加入100μL TMB顯色液, 37℃避光反應(yīng)15 min后, 每孔再加入50μL 硫酸終止液。最后, 在酶標(biāo)儀上測(cè)450 nm下的OD值。 現(xiàn)在是用天根的TMB后,不顯色(幾乎沒(méi)有藍(lán)色),后來(lái)沒(méi)有辦法,用以前的ELISA試劑盒剩下的TMB,就顯色,TMB是新的,沒(méi)有問(wèn)題,而且我用二抗加TMB后反應(yīng)藍(lán)色,這應(yīng)該是TMB和二抗都沒(méi)有問(wèn)題吧? 現(xiàn)在真不知道是哪里的原因了 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求生物學(xué)調(diào)劑 +9 | 15172915737 2026-04-01 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +11 | 林深溫瀾 2026-04-01 | 13/650 |
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-04-02 | 4/200 |
|
|
[考研] 085900土木水利336分求調(diào)劑 +4 | Zhangjiangj 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
[考研] 070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑 +14 | c297914 2026-03-28 | 14/700 |
|
|
[考研] 一志愿211,335分,0856,求調(diào)劑院校和導(dǎo)師 +14 | 傾____蕭 2026-03-27 | 15/750 |
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +20 | Y-cap 2026-03-29 | 25/1250 |
|
|
[考研] 303分 0807學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | TYC3632 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
[考研] 349求調(diào)劑 +6 | 吃的不少 2026-04-01 | 6/300 |
|
|
[考研] 086502化學(xué)工程342求調(diào)劑 +7 | 阿姨復(fù)古不過(guò) 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
[考研] 英一數(shù)二生物信息學(xué)287分,本科生物科學(xué),求調(diào)劑 +3 | 碧水xyz 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
[考研] 070300求調(diào)劑306分 +5 | 26要上岸 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 生物學(xué) 377分 +6 | zzll03 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
[考研] 080500-315分復(fù)試調(diào)劑 +9 | 上岸3821 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
[考研] 322求調(diào)劑:一志愿湖南大學(xué) 材料與化工(085600),已過(guò)六級(jí)。 +10 | XX小鄧 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +7 | Trying] 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
[考研] 085600 286分 材料求調(diào)劑 +11 | 麻辣魷魚(yú) 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +6 | 小懶蟲(chóng)不懶了 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
[考研] 一志愿吉大071010,316分求調(diào)劑 +3 | xgbiknn 2026-03-27 | 3/150 |
|