 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 520 | 回復(fù): 1 | |||
Engle_shen金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
請問是否可以直接對抗原進(jìn)行染色呢？ 已有1人參與
|
| 本人做材料出身，最近發(fā)現(xiàn)一種新材料，想做個最基本的免疫識別反應(yīng)，請問是否可以對抗原進(jìn)行染色，然后與抗體進(jìn)行識別，當(dāng)然大多數(shù)情況都是對抗體進(jìn)行染色，識別抗原，不過俺想逆轉(zhuǎn)下，請高手指教，是否FITC可以像對抗體樣，對抗原進(jìn)行染色，謝謝 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有229人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 生物材料版求助交流帖索引【更新至20090404】
已經(jīng)有12人回復(fù)
yipan 
銅蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 214 (大學(xué)生)
- 金幣: 16340.4
- 散金: 275
- 紅花: 6
- 帖子: 4174
- 在線: 195.9小時
- 蟲號: 2743878
- 注冊: 2013-10-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 整合生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Engle_shen(kx444555代發(fā)): 金幣+5, 鼓勵交流 2014-02-27 09:04:05
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Engle_shen(kx444555代發(fā)): 金幣+5, 鼓勵交流 2014-02-27 09:04:05
|
流式表面抗原染色方法 方案A：細(xì)胞懸液的表面抗原染色。 方案B：一步法胞內(nèi)蛋白染色（細(xì)胞核）。 小貼士： 1、流式抗體要儲存于避光4度，嚴(yán)格避免凍融。 2、流式抗體使用前要離心3min，避免貼壁蓋的損失，請勿斡旋混勻。 3、避免細(xì)胞成團(tuán)，以免堵塞流式細(xì)胞儀。 4、eFluor納米晶體抗體參照該品說明進(jìn)行改善。 方案A: 細(xì)胞懸液的表面抗原染色 實驗材料： 15×75mm圓底流式管或96孔板 直標(biāo)一抗或純化抗體 二抗（可選） 抗小鼠CD32/16抗體（eBioscience Cat. No. 14-0161） 人FCR結(jié)合抑制劑（eBioscience Cat. No. 14-9161） 流式染色液（eBioscience Cat. No. 00-4222）可自行配制 eFluor納米晶體抗體染色液（eBioscience Cat. No. 00-3222；可選） 7-AAD活度染色液（eBioscience Cat. No. 00-6993）或PI染色液（eBioscience Cat. No. 00-6990） 實驗流程： 1、按照樣品細(xì)胞制備方案制備懸浮細(xì)胞，調(diào)整濃度為2×107/ml。 2、（可選）封閉FCR介導(dǎo)的非特異性反應(yīng)： 小鼠：染色之前加0.5ug-1ug/100ul CD16/32抗體，孵育20min。 人類：染色之前加20ul 人FCR結(jié)合抑制劑孵育20min。 3、等分細(xì)胞懸液，每管50ul，再補加50ul染色液。 4、按照抗體說明書加入適量抗體，輕彈混勻。 5、直標(biāo)抗體。 方案B：淋巴組織細(xì)胞制備 實驗材料： 60×15mm 的組織培養(yǎng)皿 [5ml 注射器 細(xì)胞過濾器（尼龍網(wǎng)過濾） eBioscience® 流式染色緩沖液 (eBioscience Cat. No. 00-4222) 15ml或50ml的離心管。 注意： Foxp3 Fixation/Permeabilization Concentrate 1份加3份 Diluent 稀釋為工作液（1:4稀釋）。 實驗方案： 1、按照流式樣品要求制備單細(xì)胞懸液。 2、按照流式表面染色方法標(biāo)記CD3和CD4。緩沖液洗滌一次，離心完全棄上清。斡旋分散細(xì)胞。 3、加1ml Foxp3 Fixation/permeabilization 工作液，斡旋固定細(xì)胞。室溫或四度避光孵育30-60min（小鼠樣品最長可以四度固定18小時）。 4、每管加2ml 1×permeabilization buffer。 5、300g 室溫離心5min,棄上清。 6、2ml 1×permeabilization buffer重懸細(xì)胞。 7、300g 室溫離心5min,棄上清。 8、加100ul 1×permeabilization buffer 重懸細(xì)胞后，加入二抗FOXP3 （或其他胞內(nèi)抗原抗體），室溫避光孵育20min。 9、2ml 1×permeabilization buffer洗一次，300g 室溫離心5min,棄上清。 10、加2ml 流式染色液，300g 室溫離心5min,棄上清。 11、適量流式染色液重懸，即可上機(jī)檢測。同行對照依照上述步驟進(jìn)行。軟件分析結(jié)果。 |
2樓2014-02-27 09:00:45
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Engle_shen 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 生物學(xué)一志愿985，分?jǐn)?shù)349求調(diào)劑 +3 | zxts12 2026-03-21 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[基金申請]
學(xué)校已經(jīng)提交到NSFC，還能修改嗎？
 40+4
|
babangida 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級已過 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料工程（專）一志愿985 初試335求調(diào)劑 +3 | hiloiy 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +12 | 墨墨漠 2026-03-18 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 華東師范大學(xué)-071000生物學(xué)-293分-求調(diào)劑 +3 | 研究生何瑤明 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +4 | llllkkkhh 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +9 | Doleres 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +16 | 于海海海海 2026-03-19 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +9 | 大可digkids 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +7 | 困于星晨 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩318求調(diào)劑 +5 | February_Feb 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3 | xwt。 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +8 | 陌宸希 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|