 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1015 | 回復: 3 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
alman001銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
農(nóng)作物轉(zhuǎn)基因植株檢測遇到問題
|
||
|
本人做轉(zhuǎn)基因沉默植株檢測，由于轉(zhuǎn)的基因為植物內(nèi)源基因，所以設計的pcr檢測引物為沉默載體上的序列（35s的一部分+bar基因的一部分，沒有所轉(zhuǎn)基因的特異性序列，沉默載體為pFGC5941），在檢測的時候遇到了問題： 第一次，我用的是全式金的EASYtaq酶，從本作物的兩個野生型品種中沒有擴增到條帶，擬轉(zhuǎn)基因株系中有的能擴增出來目的條帶，有的沒有（而且從每個基因構(gòu)建好的載體上也能很好地擴增出目的條帶，說明引物設計得應該沒有問題），當時我覺得結(jié)果比較滿意。 第二次，為了驗證這對檢測引物好用，我又用Takara的rTaq酶對同樣的野生型和擬轉(zhuǎn)基因株系進行了檢測，pcr條件和第一次一樣，結(jié)果幾乎得到的擬轉(zhuǎn)基因株系都能擴出相應的目的條帶，更奇葩的是，從兩個本作物的野生型品種中也擴增到了相同的目的條帶，我就很郁悶。 而且之前我也根據(jù)同樣的沉默載體設計過檢測引物（至少有一條正向或反向引物為植物不含有的35s或bar序列），也經(jīng)常能在野生型中擴增出目的條帶，相當郁悶。 論壇里有木有同道做過這個載體的轉(zhuǎn)基因植株檢測，大家?guī)臀曳治鲆幌率裁丛虬�，謝啦！ |
回復此樓» 猜你喜歡
317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復
-
一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有4人回復
-
340求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復
-
求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學 ，080500材料科學與工程學碩，總分289分
已經(jīng)有5人回復
-
一志愿武漢理工，總分321，英一數(shù)二，求老師收留。
已經(jīng)有9人回復
-
一志愿北化求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復
-
085601材料工程找調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復
-
318一志愿吉林大學生物與醫(yī)藥 求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復
-
一志愿雙一流機械285分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復
-
332求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復
|
我的理解是，可以考慮污染，但是對于沉默而言，你做pcr擴增只能說明它是不是轉(zhuǎn)基因的，究竟是不是起到沉默的效果，還得看轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平吧 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-09-14 13:44:54
bired
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 14 (小學生)
- 金幣: 2832.9
- 散金: 50
- 紅花: 2
- 帖子: 1022
- 在線: 136小時
- 蟲號: 180478
- 注冊: 2006-02-09
- 專業(yè): 作物分子育種
2樓2014-03-15 15:25:47
3樓2017-08-31 15:11:23
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學 ，080500材料科學與工程學碩，總分289分 +5 | @taotao 2026-03-29 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0856材料化工調(diào)劑 總分330 +14 | zhubinhao 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東師范大學有機化學專業(yè)，初試351分，復試被刷求調(diào)劑! +3 | 真名有冰 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[碩博家園] 求調(diào)劑 有機化學考研356分 +3 | Nadiums 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
[考研] 346求調(diào)劑 一志愿070303有機化學 +3 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +5 | 舊吢 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | lin0039 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿211院校 344分 東北農(nóng)業(yè)大學生物學學碩，求調(diào)劑 +5 | 丶風雪夜歸人丶 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 化學調(diào)劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266分求材料化工冶金礦業(yè)等專業(yè)的調(diào)劑 +4 | 哇呼哼呼哼 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分調(diào)劑 +4 | 大饞小子 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿211，335分，0856，求調(diào)劑院校和導師 +4 | 傾____蕭 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學一志愿南京師范大學303求調(diào)劑 +3 | zzffylgg 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑323材料與化工 +7 | 1124361 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 柚柚yoyo 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 機械學碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 07化學303求調(diào)劑 +5 | 睿08 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | 話梅糖111 2026-03-24 | 5/250 |
|