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wh6125鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
做了原核表達(dá)，表達(dá)量很低，求助~~ 已有8人參與
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用pET-28a構(gòu)建的原核表達(dá)載體，帶N端His標(biāo)簽，測(cè)序、酶切都正確，菌株用的是BL21(DE3)，16℃ 8h、20h及30℃ 3h都有表達(dá)，但是表達(dá)量很低（見(jiàn)附件中紅框標(biāo)注），求助是應(yīng)該優(yōu)化表達(dá)條件還是換載體試試呢？這種表達(dá)量不能純化吧？ 圖中依次為Marker，空載體（誘導(dǎo)前、后），目的蛋白（1、2誘導(dǎo)前），目的蛋白（1，2誘導(dǎo)后） 后面三條淺的是誘導(dǎo)后的空載體及目的蛋白沉淀 IMG_0730.jpg |
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4樓2014-03-06 15:56:39
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