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圣迭戈銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
大神請進,定量PCR的閾值問題 已有3人參與
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| 我發(fā)現(xiàn)閾值調高調低,最終的基因拷貝數(shù)會有很大的變化啊。那么閾值到底應該是以什么標準來調整?到多少合適? |
榮譽版主 (知名作家)
| 讓軟件自動選就可以了,一般是第3到第15個循環(huán)的熒光信號的標準偏差的十倍。手動調的話,當然不可能去算那個標準差,只要選在指數(shù)擴增開始階段就好了。雖然調整閾值會讓Ct值也跟著變動,但這個變化是所有的Ct值都跟著變的,各個Ct值之間的差異還是一樣的。也就是說,只要閾值設置是在指數(shù)擴增區(qū),調大點或者小點,最終的定量結果是差不多的。 |
金蟲 (正式寫手)
琴美喜歡發(fā)呆 不喜歡發(fā)脾氣

金蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (正式寫手)

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