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yushijiang30新蟲 (初入文壇)
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關(guān)于表達(dá)載體 轉(zhuǎn)化大腸桿菌 進(jìn)行擴(kuò)繁的問(wèn)題 已有3人參與
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我有個(gè)載體PFGC5941，卡那抗性，已驗(yàn)證正確，但是量太少，想轉(zhuǎn)入大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)繁，已經(jīng)轉(zhuǎn)化了4,5次了，總是長(zhǎng)不出菌落，原先是用50微升的感受態(tài)加0.5微升的質(zhì)粒做轉(zhuǎn)化，后又加大了質(zhì)粒的量，改成3微升做轉(zhuǎn)化，還是轉(zhuǎn)不進(jìn)去，難道還要加大量嗎？ 注：有的時(shí)候含卡那平板上也長(zhǎng)出菌落，比較小，在含卡那的液體培養(yǎng)基中也能繁殖，但就是做菌液pcr驗(yàn)證沒(méi)有目的條帶 [ Last edited by yushijiang30 on 2014-3-16 at 15:45 ] |
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Freda_0829
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逐個(gè)排除一下是不是抗生素的問(wèn)題，倒平板的時(shí)候抗性比例對(duì)不對(duì)，如果所有比例都對(duì)，可以嘗試一下先提質(zhì)粒，再pcr或雙酶切驗(yàn)證 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-10-12 23:01:10
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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2樓2014-03-16 20:39:10
delicatepage
新蟲 (初入文壇)
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3樓2014-03-17 05:32:30
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4樓2014-03-17 09:07:20
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