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zc1384金蟲 (正式寫手)
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[求助]
請(qǐng)問下~~~關(guān)于PBS緩沖液與蛋白質(zhì)靜電屏蔽 已有1人參與
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本人不是生物專業(yè)，有些問題不是很清楚。請(qǐng)不吝賜教。 PBS緩沖液的配方中一般加入137mM（8g/1000mL）氯化鈉。這個(gè)氯化鈉的濃度是不是固定的，若是氯化鈉濃度高了，比如加到600mM是不是在PBS的使用上對(duì)蛋白或細(xì)胞等有影響。因?yàn)榭吹揭黄墨I(xiàn)，氯化鈉濃度加到600mM，這樣一來肯定會(huì)屏蔽了蛋白質(zhì)上的電荷，濃度高了對(duì)蛋白質(zhì)活性是否有影響？ 不知道在實(shí)驗(yàn)中，PBS緩沖液中可不可以增加氯化鈉的濃度。 自己不太懂，謝謝！ |
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zc1384
金蟲 (正式寫手)
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2樓2014-03-17 11:03:05
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zc1384: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝~ 2014-03-18 11:13:06
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zc1384: 金幣+10, ★有幫助, 謝謝~ 2014-03-18 11:13:06
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磷酸鹽緩沖液多種多樣，不同的pH，鈣鎂離子等等的 我覺得PBS最主要的還是8的NaCl‰以及總含量10‰左右的鹽度 我推測這個(gè)最初還是通過生理鹽水的等滲液換算過來的 生理鹽水也是10‰左右的（你要是在這個(gè)上面較真，那就沒意義了）。 一般我們?nèi)芙獾鞍最惖臇|西很多都是用生理鹽的水（PBS、D-hanks等等）的，主要是很多比較純的蛋白在純水里面幾乎不溶（就比如胰蛋白酶） 蛋白等電點(diǎn)這個(gè)是個(gè)很奇妙的東西，鹽度不合適正好碰到等電點(diǎn)了蛋白就直接析出來了。 PBS我們做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)最多是用來調(diào)節(jié)等滲的，NaCl的量無特殊要求的話是固定的。至于其他實(shí)驗(yàn)我就不好說了，看具體情況了 |
3樓2014-03-17 11:34:42
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