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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » PBS緩沖液配制問題
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065316金蟲 (小有名氣)
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PBS緩沖液配制問題
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| 本人菜鳥，詢問有關PB、PBS緩沖液的區(qū)別？另外就是PBS緩沖液中，什么時候加NaCl、KCl，網(wǎng)上好多配方哦，都搞糊涂了。各位兄弟姐妹，求助�。� |
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 PBS緩沖溶液配制 |
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PB和PBS是免疫細胞化學實驗中最為常用的緩沖液， 0.01mol/L的PBS主要用于漂洗組織標本、稀釋血清等，其pH應在7.25～7.35之間，否則需要調(diào)整。 0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。 一般情況下，0.2mol/l PB的pH值稍高些，稀釋成0.01mol/L的PBS時，�？蛇_到要求的pH值，若需調(diào)整pH，通常也是調(diào)PB的pH。 配制方法為： 1．0.2mol/L(pH7.4)磷酸鹽緩沖液（Phosphate Buffer, PB） 試劑： NaH2PO4•2H2O Na2HPO4•12H2O 配制方法：配制時，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，兩者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液（PB），根據(jù)需要可配制不同濃度的PB和PBS。 �。�1）0.2mol/L的 Na2HPO4；稱取Na2HPO4.12H2o 31.2g(或 NaH2PO4•H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。 �。�2）0.2mol/L的 Na2HPO4：稱取NaHPO4.•12H2o 71.632g（或 Na2HPO4•7H2O 53.6g或 Na2HPO4•2H2o 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。 （3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4•12H2O,充分混合即為0.2mol/L的PB（pH約為7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通過改變二者的比例來加以調(diào)整，室溫保存即可。 2．0.01mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水（Phosphate Buffered Saline, PBS） 試劑：0.2mol/L PB 50ml NaCl 8.5～9g(約0.15mol/L) 重蒸水 至1000ml 配制方法：稱取NaCl 8.5～9g及0.2mol/L的PB 50ml，加入1000ml的容量瓶中，最后加重蒸水至1000ml，充分搖勻即可。若擬配制0.02mol/L的PBS，則PB量加倍即可，依此類推 |
2樓2012-11-20 15:12:19
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請教你一個問題：文獻中phosphate-buffered saline 可以縮寫為PBS，phosphate buffer solution也可以縮寫為PBS，請問他們兩個一樣嗎，是一樣的配置方法嗎。我知道的PBS（PH=7.4 1000ml）配方為11.65g Na2HPO4， 1.65gKH2PO4，9gNaCl；溶解后用0.1M氫氧化鈉或鹽酸調(diào)PH值到7.4。 另外一種配方為：取磷酸二氫鉀1.36g， 加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79ml，用水稀釋至200ml，即得。這兩種配方，那種正確。我就想配一種PH=7.4的緩沖溶液，做反應用。還有比如0.1M phosphate buffer solution of PH 7.4 這種緩沖溶液怎么配，0.1M 指什么，怎么確定。多謝了 |
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陳瑩
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